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时间:2019-06-27
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1、广西大学硕士学位论文氯氰菊酯降解菌的筛选及降解特性研究姓名:顾宝群申请学位级别:硕士专业:环境工程指导教师:刘幽燕20060501氯氰菊酯降解菌的筛选及降解特性研究摘要氯氰菊酯被认为是对人、畜低毒的农药,但对水生物毒性极大,其残留会严重破坏生态环境。生物降解是处理农药残留的有效方法之一。本文以氯氰菊酯降解菌的筛选研究为主线,建立高效的筛菌模型并进行菌株降解特性的研究。论文中菌株的初筛选用紫外分光光度法分析,复筛及降解特性实验中采用高效液相色谱法分析。以相对贫乏的培养基作为限制性条件构建菌株筛选模型。选用2种筛选方法,采用直接涂布分离法得到32株菌,22株有降解活性,
2、其中G201和G203的降解能力稳定且降解率最高:液体富集培养法,共分离出79株,有降解活性的为68株,其中GF31降解氯氰菊酯效果最好.被初步鉴定为弗拉特氏菌属(Frateuria)。首先以G201和G203为目标菌株研究其降解特性。2株菌降分别在pH7.0和pH6.0~7.0时降解率最高;底物浓度在100~200mg/L时,2株菌能够维持较高的降解速率。添加少量的外加碳、氮源能够提高菌株对氯氰菊酯的降解率。在添加O.1%牛肉膏的条件下,2株菌对初始浓度为50mg/L的氯氰菊酯7d的降解率分别为68%币954.4%。菌株GF31降解氯氰菊酯的最适pH值为7.O;降
3、解酶无须诱导;底物浓度高达300mg/L仍保持较高降解速率;降解进程实验表明,在含1OOmg/L氯氰菊酯的无机盐发酵液中,培养5d降解率为33%,5天后降解率不再升高。优化降解条件,发现添加适量外加碳源能够显著提高菌株的降解能力;若以1.Og/L蛋白胨为氮源,菌株GF31对100mg/L氯氰菊酯降解8d的降解率可达70%。初步研究了菌株GF31对氯氰菊酯的降解途径。根据降解产物的气谱一质谱连机分析,又结合氯氰菊酯分子式的结构特征和农药结构易断裂部位,初步确定降解产物为二氯菊酸(DCVA)和3一苯氧基苯甲酸(3一PBA)。关键词:农药氯氰菊酯生物降解筛选降解特性,I,
4、.ISOLATIONANDCHARACTEROFCYPERMETHRINDEGRADINGSTRAINSABSTRACTCypermethrin(CM)exhibithighinsecticidalactivitycombinedwithlowmammaliantoxicity,howeveLithasanextremelyhightoxicitytotheaquaticenvironment.Biodegradationplaysanimportantroleinthetreatmentofremainedpesticide.Thisarticleisaboutt
5、hescreeningofhighly.effective—CM..degradationstrainsandinvestigationofitsdegradationcharacters,whichincludes(1)theselectionanddeterminationofanalyticmethodsofCMappropriateforthedifferentexperimentalsystems;(2)thebuildingofanefficient,simpleandconvenientscreeningmodeltoobtainanaimedstra
6、insfromsoil;(3)optimizationofdegradingconditionssuchaspH,CMconcentrationandaddednutrition;(4)theexplorationofthemetabolicpathwayofCMdegradationAccordingtothedemandofexperiment,photospectrometerandhigh.performanceliquidchromatographywereusedforanalysisofCMrespectively.Ahighlyeffectivesc
7、reeningmodelwasbuilt,inwhichenrichmentwasconductedbyaddingadefiniteamountofCMintotheinnutrientmedium·Two.kindsofscreeningoperationpresswereselected.Byusingdirectspreadingmethod.thirty—twosortsofCM·resistantstrainswereisolatedfromsoil,amongwhichtwenty—twokindsofstrainsshowedtheCM—degr
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