实验一细胞形态及细胞器的观察

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1、细胞生物学实验吉林师范大学实验课要求1.安全第一。2.认真听课，随时发问。3.上课期间不要吃东西，手机调到震动。4.缺课1/3以上者直接进入重修。5.成绩包括：实验报告，平时成绩，期末小考。实验一细胞形态及细胞器的观察实验目的（1）学习普通光学显微镜的构造和原理，重点掌握光学显微镜的规范操作方法。（2）观察动植物细胞的细胞及其细胞器结构，重点观察有丝分时期的形态结构特征及染色体的变化规律。实验用品普通光学显微镜以及动植物细胞装片。口腔上皮细胞，洋葱鳞茎表皮细胞，洋葱根尖细胞。主要内容显微镜的发展显微镜的光学原理显微镜的

2、几个基本概念显微镜的结构显微镜的使用观察细胞及细胞器的形态-实际操作几个重要的分辨率人眼：0.2mm光学显微镜：0.2um电子显微镜：0.2nm1.显微镜的发展1.1人眼：人眼观察物体的能力是有限的。一般的情况下，在25cm的明视距离内，人眼只能分辨相距0.1-0.2mm的两个物体。也就是说，当两个物体相距不到0.1mm的时候，人眼就会把它们看成是一个物体了。这个极限便称为人眼的分辨本领。1.2放大镜：约在四百年前眼镜片工匠们开始磨制放大镜。当时的放大镜的放大倍数只有3—5x1.3显微镜：1590年，荷兰和意大利的眼镜

3、制造者造出类似显微镜的放大仪器。1673～1677年期间，列文胡克制成单组元放大镜式的高倍显微镜19世纪70年代，德国人阿贝奠定了显微镜成像的古典理论基础。1850年出现了偏光显微术；1893年出现了干涉显微术；1935年荷兰物理学家泽尔尼克创造了相衬显微术，1611年，德国天文学家开普勒用两片双凸透镜分别作为物镜和目镜，使放大倍数有了明显的提高，以后人们将这种光学系统称为开普勒式望远镜。人们用的折射式望远镜还是这两种形式，天文望远镜一般是采用开普勒式。罗伯特·虎克制造的显微镜（1665）放大倍数：140倍2显微镜的光

4、学原理折射和折射率光线在均匀的各向同性介质中，两点之间以直线传播，当通过不同密度介质的透明物体时，则发生折射现象，这是由于光在不同介质的传播速度不同造成的。2.2凸透镜的五种成象规律(1)当物体位于透镜物方二倍焦距以外时，则在象方二倍焦距以内、焦点以外形成缩小的倒立实象；(2)当物体位于透镜物方二倍焦距上时，则在象方二倍焦距上形成同样大小的倒立实象；(3)当物体位于透镜物方二倍焦距以内，焦点以外时，则在象方二倍焦距以外形成放大的倒立实象；(4)当物体位于透镜物方焦点上时，则象方不能成象；(5)当物体位于透镜物方焦点以

5、内时，则象方也无象的形成，而在透镜物方的同侧比物体远的位置形成放大的直立虚象。显微镜的成像原理显微镜和放大镜起着同样的作用，就是把近处的微小物体成一放大的像，以供人眼观察。只是显微镜比放大镜可以具有更高的放大率而已。物体位于物镜前方，离开物镜的距离大于物镜的焦距，但小于两倍物镜焦距。所以，它经物镜以后，必然形成一个倒立的放大的实像A'B'。A'B'靠近F2的位置上。再经目镜放大为虚像A''B''后供眼睛观察。目镜的作用与放大镜一样。所不同的只是眼睛通过目镜所看到的不是物体本身，而是物体被物镜所成的已经放大了一次的像。3

6、显微镜的几个基本概念3.1光源：能发射光波的物体。可见光频率范围：7.5×1014-3.9×1014Hz。真空中对应的波长范围：390nm–760nm相应光色：紫、蓝、青、绿、黄、橙、红3.2分辨率(鉴别距离)：显微镜能分辨的最小距离，用D表示。显微镜的鉴别距离越小，分辨率越高。D=0.61λ/nsinD：分辨率λ:光波的波长N:介质折射率α:物镜镜口角3.3孔径角：由标本上一点发出的进入物镜最边缘光线L和进入物镜中心光线OA之间的夹角称为孔径角。3.4数值孔径：N·A=nsin,叫物镜的数值孔径。数值孔径与显微

7、镜的分辨率有密切关系，越短，NA越大，分辨率越高。物镜数值孔径在显微镜下所看到的物像和实际物体之间的大小比例叫显微镜的放大率或放大倍数。显微镜下物像的放大主要由物镜、镜筒长度、目镜所决定。适合的放大倍数决定于物镜的数值孔径，一船应为数值孔径的500――1000倍。显微镜的总放大率（Mt)应为：Mt=Mob×MeMob：物镜放大率Me：目镜放大率3.6放大率像差球差象散慧差场曲负畸变正畸变色差色差校正3.7焦点深度在显微镜的光轴上有一段距离范围内物体被看得清晰。超出这段距离的物体就模糊不清。这段距离位于显微镜焦点的上

8、下很小的范围之内。这段距离的上下限叫焦点深度。焦点深度3.8视场数目镜中观察到的物像的一定范围叫视野。显微镜的总放大率小的时候所能看到的标本的范围大，而总放大率愈大所能看到的标本的局部愈小。所以说视野与显微镜的总放大率成反比。在同一总放大率的条件下视野也可有大小差别。这种差别决定于目镜的某些性能。首先目镜的视场光栏的直径是最主要的