中药及其提取物诱导骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化的研究进展

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2、，还有另一类重要的成体干细胞——骨髓问充质干细胞（ｍｅｓｅｎｅｈｙｍａｌｓｔｅｍ成纤维样细胞集落数量几乎增加一倍，并显著提高碱性磷酸7酶活性、骨钙素分泌量和钙盐沉积量等。研究提示淫羊藿总黄酮产生的代谢产物中有未知的活性成分能够诱导ＭＳＣｓ向成骨细胞方向分化，并提高成骨细胞的活性和功能。李东晓等【８３将体外培养的大鼠ＭＳＣｓ载入三维多孔支架构成组织工程化ＭＳＣｓ，植入模型大鼠肌内，以灌胃或局部释放给予淫羊藿总黄酮，观察在体内环境下支架材料上的ＭＳＣｓ分化情况，同时测定受试动物血清中转化生长因子Ｂ和骨形态发生蛋白含量。结果２００ｍｇ／ｋｇ灌胃给予或局部释放均可显著诱导ＭＳＣｓ的成骨分化，且在支

3、架中形成类骨组织。王和呜等咿１采用巴戟天提取物含药血清培养骨髓基质细胞，证实巴戟天提取物含药血清均能促进骨髓基质细胞向成骨细胞分化。１．３ｃｅｌｌｓ，ＭＳＣｓ），其是一种分泌多种细胞因子的未分化的骨髓基质细胞¨ｑ】。在一定环境和特异因子诱导下，ＭＳＣｓ可分化为除造血以外的多种组织细胞，如可分化为内胚层来源的肝细胞，中胚层来源的成骨细胞、软骨细胞、心肌细胞Ｈｏ和血管内皮细胞，外胚层来源的神经元样细胞口ｊ。ＭＳＣｓ具有很强自我更新能力和多向分化潜能的特点，随着组织工程学、分子生物学等基础学科的飞速发展和应用，ＭＳＣｓ已成为了生命科学领域研究的热点。近年来研究显示，中药及其提取物在诱导ＭＳＣｓ向

4、成骨分化上能起到积极作用，现就近几年中药及其提取物在此方面7的作用综述如下。ｌ含中药血清诱导ＭＳＣｓ向成骨细胞分化中医学认为，肾藏精，主骨生髓，髓藏于骨腔内，滋养骨复方含药血清诱导ＭＳＣｓ向成骨细胞分化吴云刚等ｕ则将右归饮（熟地黄、山药、山茱萸、枸杞子、菟丝子、鹿角胶、杜仲、肉桂、当归、制附子）含药血清培养人骨髓基质干细胞，ＭＴｒ检测、钙结节染色及细胞内碱性磷酸酶（ＡＬＰ）含量测定，表明右归饮对成骨细胞的活性有促进作用（Ｐ＜０．０５）。笔者认为右归饮可以通过增加碱性磷酸酶的活性促进钙沉积，从而引起成骨，这与激素降低碱性磷酸酶的活性，刺激破骨细胞活动，引起钙流失的作用相抵消。同时右归饮含药血

5、清可以促进成骨细胞增殖，从而进一步引起成骨作用。范红旗等ｕ¨自拟复方接骨中药（厚朴１０ｇ，大黄１０ｇ，枳壳ｌＯｇ，桃仁１０骼，骨的生长发育依赖肾气的滋养与推动。中药血清药理学认为含中药血清既能去除中药内未知的毒性又能反映中药的药效。在上述理论的指导下，许多学者将含补肾、接骨等中药的血清应用于诱导ＭＳＣｓ向成骨细胞分化的研究，并取得了可喜的成果。１．１单味药含药血清诱导ＭＳＣｓ向成骨细胞分化黎晖等∞Ｊ在培养液中添加不同浓度龟板血清培养ＭＳＣｓ。应用碱性磷酸酶染色、ＶｏｎＫｏｓｓａ（冯科萨）钙结节染色、骨钙素测定等方法7分析细胞成骨活性。实验发现ＭＳＣｓ在龟板血清诱导作用下，可向成骨细胞方向分

6、化，表现为碱性磷酸酶活性升高和钙沉积形成；低、中浓度组明显促进骨钙素升高。笔者推测龟板血清促ＭＳＣｓ成骨细胞方向分化可能与其益肾作用有关。Ｉ．２单味药提取物含药血清诱导ＭＳＣｓ向成骨细胞分化马慧萍等ｏ¨将淫羊藿总黄酮和含淫羊藿总黄酮大鼠血清，分别以不同浓度培养ＭＳＣｓ。四唑盐比色试验（ＭＴｒ）检测细胞增殖，检测碱性磷酸酶、骨钙素、钙盐沉积量等指标。结果表明淫羊藿总黄酮对ＭＳＣｓ增殖和成骨分化各项指标均无显著性影响，而含淫羊藿总黄酮大鼠血清使碱性磷酸酶染色阳性的ｇ，苏木１０ｇ，当归１０ｇ，红花５ｇ，骨碎补１５ｇ，川断１５ｇ，熟地１５ｇ，自然铜１０ｇ，龟板ｌＯｇ，枸杞子１５ｇ，杜仲１５ｇ）制备

7、含药血清。将第３代的ＭＳＣｓ用于实验，实验组细胞用０．１％含药血清＋ＤＭＥＭ培养。对照组细胞用０．１％非含药血清＋ＤＭＥＭ培养。结果在７２、９６、１２０ｈ时实验组骨髓间充质干细胞均比对照组增殖迅速。第２，３周末时实验组碱性磷酸酶活力显著大于对照组。镜下观察实验组骨髓间充质干细胞大量诱导分化为成骨细胞，对照组成骨细胞数量、密度明显低于实验组（Ｐ＜Ｏ．０５）。实验结果显示复方接骨中药含药血清可以促进体外培养的骨髓间充质干细胞