《发酵染菌及防治》PPT课件

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1、第七章 发酵染菌及防治1发酵染菌控制的意义保证发酵产品的质量和收率的稳定保证发酵生产正常有序的进行有利于节约型社会的建立2发酵异常现象菌种在扩培阶段发生异常现象,必然会对发酵过程产生巨大的影响异常现象是指发酵过程中某些理化参数和生物参数发生与原有特性不同的改变包括种子培养异常和发酵异常3种子培养异常菌体生长缓慢菌种自身的原因培养基的原因操作过程的原因4种子培养异常菌丝结团通气溶氧不足、搅拌剪切力过大、培养基质量下降、种子冷冻保藏的时间长、泡沫多、培养液粘度低5种子培养异常代谢不正常表现出糖、氨基酸等的变化不正常,菌体浓度和代谢产物不正常。原因培养物和培养基不相匹配、培养环境差、接种量

2、少、杂菌污染等6发酵异常菌体生长差:由于种子质量问题或者是种子的保藏时间较长,导致活菌少或孢子萌发率低,延迟期长,发酵液内的菌体数量少。种子质量差,发酵条件差,培养基质量差均可引起糖、氧消耗慢甚至停滞。7发酵异常pH异常表现为pH突然升高或突然降低,主要与培养基原料差、灭菌不彻底,加糖和加油过于集中。8溶解氧水平异常:发酵过程中,如果溶解氧水平发生了异常变化,一般都是发酵染菌的表现。当受到好气性杂菌污染时,溶解氧的变化是短时间内下降,直至为零,且在较长时间内不能回升;当受到非好气性杂菌污染时,抑制生产菌的生长,降低溶解氧的消耗,使溶氧升高。发酵异常9发酵异常菌体浓度过高或过低泡沫过多

3、10染菌隐患的检查显微镜检查法革兰氏染色法11染菌隐患的检查肉汤培养法检查培养基和无菌空气是否带菌或菌种中是否有噬菌体。一般使用葡萄糖酚红肉汤作为培养基12染菌隐患的检查平板划线培养或斜面培养检查法以平板划线和肉汤培养结果为主要根据要定期取样,取样时防止外界杂菌混入倒平板空培养待测样品划线培养观察13染菌隐患的检查发酵过程的异常现象观察法溶氧异常排气中的CO2异常变化14发酵染菌的原因发酵工艺流程中的各环节漏洞发酵过程管理不善15染菌原因的分析国外一发酵工厂的染菌原因分析16染菌原因的分析国内一发酵企业染菌的原因分析17杂菌污染后的挽救和处理种子培养期染菌的处理种子罐染菌发酵罐×备用

4、种子有无重新制备种子物料管道供气管道彻底灭菌18杂菌污染后的挽救和处理发酵前期染菌的处理培养基中碳、氮含量高终止发酵,重新灭菌再接入种子进行发酵培养基中碳、氮消耗量多放掉部分料液,加入新鲜料液,重新灭菌再接入种子进行发酵降温培养、调节pH、补加培养基进行处理19杂菌污染后的挽救和处理发酵中后期染菌的处理轻微染菌终适当加入杀菌剂或抗生素及正常的发酵液以抑制杂菌的生长速度。代谢产物已达一定水平产品的含量达一定值,只要明确是染菌也可放罐加热至120℃,保持30分钟后排放无提取价值的发酵液20杂菌污染后的挽救和处理染菌后对设备的处理发酵罐需要放罐后彻底清洗空罐加热灭菌至120℃以上、保持30

5、min后才能使用甲醛熏蒸或溶液浸泡12h以上处理21杂菌的预防措施强化空气净化过程1.空气进化流程的选择2.过滤介质的选择3.过滤介质的填装4.空气净化系统的管理22严格培养原料及设备的灭菌原料的预处理1.原料除杂:防止机械受磨损2.粉碎:减少固体的团块3.浸泡:使营养物质便于菌体的利用4.糊化、液化和糖化:大分子物质分解为小分子物质,易于菌体利用23严格培养原料及设备的灭菌培养基的灭菌在保证杀灭杂菌的前提下,尽可能多地保留营养物质。一般选择高温蒸汽对培养基、发酵罐及管路系统进行灭菌。一般微生物的营养细胞在60℃维持10min就会死亡。噬菌体一般在80℃下就会死亡24设备的灭菌实罐灭

6、菌时,要充分排尽发酵罐内的冷空气对设备的死角要进行处理25法兰连接死角发酵工厂的有关管路要保持光滑、畅通、密封性好,以避免和减少管道染菌的机会26渣滓在罐底形成的死角培养基在罐底形成的膜层,有一定的绝热作用,容易形成死角。27不锈钢衬里的死角发酵液通过裂缝进入衬里和钢板之间,窝藏在那里形成死角。采用复合钢板制造发酵罐不产生死角28接种管路的死角种子罐与发酵罐的一段连接管路的灭菌是与发酵罐的灭菌同时进行的。应该在1处焊接上一个排气阀。29排气管的死角罐顶排气管弯头处如有堆积物,其中窝藏的杂菌不容易彻底消灭,而当发酵时受搅拌的震动和排气的冲击就会一点点地剥落下来造成污染。排气管的直径太大

7、,灭菌是蒸汽流速小也会使管中部分耐热菌不能全部杀死。所以排气管不宜过大或过小。30不合理补料管配置造成的死角不合理的补料管也容易造成死角31压力表安装不合理造成的死角压力表安装不合理容易造成死角32定期检测发酵设备及管道发酵设备的定期检查1.搅拌系统转动有无异常2.机械密封是否严密3.罐内的螺丝是否松动4.罐内的管道有无堵塞5.罐体连接阀门是否严密发酵罐气密性的检查方法是维持温度不变,观察罐压是否恒定33管道、阀门的定期检查管道容易因为各种原因发生渗漏导致

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