实验八血型鉴定及交叉配血试验

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1、实验八血型鉴定及交叉配血实验（一）ABO血型鉴定1．实验原理红细胞膜上具有血型糖蛋白，作为抗原，也称为凝集原；ABO血型就是根据红细胞表面抗原来确定的，根据红细胞上有或无A抗原或/和B抗原，将血型分为A型、B型、AB型及O型四种。血清中含有相应的特异性抗体称为凝集素。凝集原和相应的凝集素特异性结合，使红细胞凝集成团，进而引起红细胞破裂，产生溶血。ABO血型鉴定的原理是利用红细胞凝集试验，将待测血液分别与已知含A抗体和B抗体的标准血清混合，观察是否发生凝集现象，判断待测血液红细胞上有何种抗原，由此确定待测血液的血型。AB

2、O血型分类ABO血型正反定型结果（一）ABO血型鉴定2．血型鉴定方法标记凹载玻片：左上角写A，右上角写B。分别吸取标准A血清和标准B血清各1滴滴于双凹载玻片左端和右端。采血针刺破左手无名指尖，待血液出来后，用2支毛细滴管吸取血液，分别加入到玻片左、右两侧的血清内，并用牙签搅拌，使标准血清与血液混匀。（切勿混用毛细滴管和牙签！）手持玻片转动数次，转动时玻片应保持在一个水平面上，然后置室温下5min后观察结果。肉眼观察：如果外观略呈花边状或锯齿状，看上去有沉淀，则多为凝集；如果血滴呈均匀状态，边缘整齐，则多为不凝集。进一步

3、在低倍镜下观察：在低倍镜下，如果观察到红细胞凝集成团，或尚有少数游离细胞，则为凝集现象；如果红细胞均为游离状态，则为不凝集。根据镜下所见有无凝集现象判定血型。取干净载玻片滴加定型剂消毒取血消毒取血消毒观察记录结果实验步骤①②抗A抗B③用70－75％的酒精消毒取血部位消毒取血部位用针扎一下消毒部位，使血冒出，立即滴一滴血液在抗A或B上。④抗A抗B再用70－75％的酒精擦洗消毒刚用针扎的部位，然后再取一滴血液于抗B或A上。抗A抗B⑤观察有无凝集，并按下表判定结果。血型抗A试剂抗B试剂ABOAB+--+-+-+呈现均匀的淡红

4、色时，表明不凝集，用“一”号表示。在试剂里凝结成絮团状，形成鲜明的对比，表明凝集，用“十”号表示。主侧配血用患者血清与供者红细胞进行试验次测配血供血者血清与患者红细胞进行试验患者献血者主侧次侧（二）交叉配血试验交叉配血的要求主侧配血要求：绝对不可以有凝集或溶血现象。次测配血要求：供血者血清加受血者红细胞在允许范围内，可以有凝集现象，但不可以有溶血。凝集不凝集交叉配血的目的交叉配血试验是输血前必要的步骤，主要是检查受血者血清中有无能破坏供血者红细胞的抗体。主要目的是为了防止输血后产生溶血性反应。尽可能确保对人和一个病人来

5、说，输了供血者的血不会引起有害反应，并且使红细胞在输注后能保持最长的存活时间。交叉配血试验方法盐水介质配血酶介质配血菠萝酶，无花果酶，木瓜酶抗球蛋白介质配血经典方法，加LISS（低离子介质溶液）的方法聚凝胺介质配血凝胶方法配血盐水介质配血方法患者献血者主侧次侧离心看结果阳性阴性抗球蛋白配血方法患者献血者主侧次侧37℃37℃水浴30分钟三洗抗球蛋白方法配血方法加抗球蛋白离心看结果阳性阴性抗球蛋白试剂上海市血液中心血酶介质配血方法酶上海市血液中心血主次侧均加酶患者献血者主侧次侧酶介质配血方法离心看结果阳性阴性37℃37

6、℃水浴30分钟二、Rh定型1、使用盐水介质试剂用LIM配制的红细胞悬液，可以代替由生理盐水配制的红细胞悬液在盐水介质试剂中进行Rh定型，两者定型方法和效果均相同。聚凝胺(Polybrene)配血方法患者献血者主侧次侧室温放置1分钟Polybrene上海市血液中心血主次侧均加聚凝胺聚凝胺(Polybrene)配血方法离心聚凝胺引起红细胞非特异性凝集阳性阴性重悬液上海市血液中心血主次侧均加重悬液看结果