一株纤维素降解菌的筛选及其产酶条件优化

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1、第49卷第1期湖北农业科学Vol．49No.120第101年期1月HubeiAgriculturalSciencesJan．，2010一株纤维素降解菌的筛选及其产酶条件优化卢月霞1121，宋惠月，刘凯楠，黄慧敏（1．河北工程大学农学院，河北邯郸056021；2．河北省永年县林业局，河北永年057150）摘要：从长期富含枯枝落叶的土壤和造纸厂排污口污泥中分离筛选到一株能降解纤维素的放线菌，对其在以羧甲基纤维素为惟一碳源的产酶培养基上进行产酶条件研究，结果表明，该菌产酶较合适的温度是28℃，培养基起始pH值是7．0，接种培养24h的种子液产酶量较高，以2％的接种量接种酶活较高，其在优化条件

2、下的酶活可达到44．76U／mL。关键词：纤维素降解；放线菌；筛选；产酶条件中图分类号：Q939.97文献标识码：A文章编号：0439－8114（2010）01－0095-03ScreeningofACellulose－decomposingActinomycesStrainandStudyofItsEnzyme－producingConditionsLUYue－xia1，SONGHui－yue1，LIUKai－nan2，HUANGHui－min1（1．DepartmentofAgriculture，HebeiUniversityofEngineering，Handan056021，H

3、ebei，China；2．ForestryBureauofYongnianCounty，Yongnian057150，Hebei，China）Abstract：ACellulose－decomposingactinomycesstrainwasisolatedfromtherichhumussoilandthesludgeinlimberholeofthepapermill．Carboxymethylcelluloseasthesolecarbonsourceinthemediawasusedinthestudyofenzyme－producingcondition．Theresult

4、sshowedthattheoptimumenzyme－producingconditionswereat28℃withmediumprimarypH7．0，andinoculatedwith2％inoculumwhichhadbeencultivatedfor24hours．Itsenzymeactivitycouldreach44．76U／mLundertheoptimumconditions．Keywords：cellulosedecomposition；actinomyces；screening；enzymeproducingconditions纤维素是地球上分布最广的碳水化合

5、物，同时1材料和方法又是自然界中数量最大的可再生资源［1］。在工业、农业和生活废料中，纤维素含量占有相当大的比重，1．1材料尤其是农村作物秸秆，由于没有有效的处理方式通1．1．1样品来源试验分离所用样品来自长期富常被大量焚烧，这样不仅污染了环境，而且浪费了含枯枝落叶的土壤和造纸厂排污口污泥。资源［2］，因此我们迫切需要一种既无污染又可生产1．1．2培养基初筛培养基、鉴别培养基及液体发有用产品的处理方式。利用微生物降解纤维素因具酵培养基均参照文献［5］配方制作。有经济、有效、节约等优点而成为当前热点之一［3］。1．2方法能够降解纤维素的微生物目前研究较多的是丝状1．2．1纤维素降解菌的初

6、筛称取0．5g样品加入真菌和细菌，对放线菌的研究还比较少［4］到49．5mL含有玻璃珠的生理盐水中，作为10－2稀。本研究从长期富含枯枝落叶的土壤和造纸厂释度，振荡30min混匀，并将上清液做10－3－4－5，10，10排污口污泥中筛选出一株能较好降解纤维素的放稀释，各取1mL稀释液，采用初筛培养基进行基内线菌，并对其产酶条件进行了初步研究，旨为纤维接种稀释涂布法，每个稀释度作2次重复，28℃培养素资源的有效降解和合理利用提供一定的理论依48h，挑取生长较快的菌株进行纯化，纯化2次，镜据。检，接种到初筛培养基斜面，4℃保存。收稿日期：2009－08－03作者简介：卢月霞（1973－），

7、女，河北邯郸人，讲师，硕士，从事微生物学方面的教学与科研工作，（电话）13932057145（电子信箱）luyuexia727399＠163．com。96湖北农业科学2010年1．2．2纤维素降解菌活性定性检测初筛得到的起始pH值、菌龄和接种量对产酶的影响。菌株用灭菌牙签点接到鉴别培养基上，28℃培养2结果与分析48h，选择菌落周围产透明圈的菌株进行液体发酵测定酶活。2．1纤维素降解菌的分离筛选与纯化1．2．3菌株的复筛将产透明圈的菌株接种于液