不同铬浓度处理牛心包瓣体外疲劳试验后之组织电镜观察(1)

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1、第16卷第3期山东生物医学工程Vol.16No.31997年ShandongJournalofBiomedicalEngineering1997不同铬浓度处理牛心包瓣体外疲劳试验后之组织电镜观察王雪梅许莉王春祥(山东省千佛山医院心外科,济南250014)摘要011%及0165%浓度的三氧化二铬处理的牛心包瓣膜,经加速体外疲劳模拟试验后之组织用电镜观察发现:011%铬浓度处理的牛心包瓣膜组织铬鞣剂分布均匀,原纤维直径粗细一致,弹力纤维存在,横纹轮廓清晰明显,胶原纤维排列整齐。0165%铬浓度处理的牛心包瓣膜组织看到原纤维外有较明显的铬鞣剂积聚,胶原纤维周期横纹模糊不清,纤维直

2、径粗细不一,纤维表面不平滑,部分胶原纤维溶解、断裂,排列紊乱。关键词牛心包生物瓣体外疲劳模拟试验胶原断裂瓣叶失功〔1〕1材料与方法一组013%纯化戊二醛,110%阳离子油预处理,011%三氧化二铬复鞣的牛心包组织。二组013%纯化戊二醛预处理,0165%三氧化二铬复鞣的牛心包组织。分别用两组制成同样型号的全弹性支架的生物瓣,每组6只,经加速体外疲劳模拟试验台318亿次循环监测,在失功瓣膜的不同部位各取4~5块组织。以2%戊二醛、锇酸双固定,上升浓度逐级丙酮脱水,环氧树脂618包埋,LKB~V超薄切片机切片,铀~铅双染,H~600透射电镜(TEM)观察。扫描电镜SEM样品制备

3、,脱水方法与上相同,脱水后经醋酸异戊酯置换,CO2临界点干燥,IB~5离子溅射仪镀铂,S~570扫描电镜观察。2结果两种不同方法处理的牛心包瓣,经疲劳试验后,肉眼所见二组瓣膜失功比一组瓣膜严重,二组6只瓣膜均发生了不同程度的瓣叶撕裂和穿孔,且都集中于应力的交界处,瓣叶流出面粗糙。一组中有1只完好无损,3只穿孔,2只有轻微撕裂。TEM观察:一组原纤维直径粗细均匀,排列整齐,纤维周期横纹明晰可见,大部分胶原纤维结构保存良好,胶原纤维束之间弹力纤维仍可见着。二组原纤维直径粗细不均,原纤维较粗,一些不定形的聚结颗粒无规则地分布在纤维之间,胶原纤维横纹模糊不清,束间隙变宽,部分弹力纤

4、维消失。SEM观察:一组纤维致密,呈网状分布,分子内和分子间的弹力纤维及胶原纤维断裂较少,且断裂的纤维呈韧性断裂,瓣叶流出面方向不同、粗细不一之胶原纤维束,在瓣叶撕裂处见到胶原纤维磨损和韧性断裂,沉淀颗粒稀少,铬鞣剂基本均匀地分布于整个原纤维断面上。二组见胶原纤维呈束状结构,间隙增宽,胶原纤维松懈,排裂紊乱,胶原纤维结构显示不同程度的破坏,纤细的纤维首先遭到破坏、断裂,断裂面呈脆性,瓣叶流出面见方向不同、粗细不一之胶原纤维束,沉淀颗粒较多,在原纤维外则有比较明显的铬鞣剂积聚现22山东生物医学工程1997年象。3讨论近年来生物瓣的研究主要集中在瓣叶组织的生化处理上。戊二醛处理

5、的基本原理是通过与氨基结合加强生物组织胶原纤维内分子和分子间的交联,但是戊二醛有脱交联作用,使胶原分子间、分子内交联不充分。戊二醛处理后尚存有未配对的羧基可促使钙化。三氧化二铬易与胶原分子的游离羧基形成配位络合。但浓度较大时,铬易聚合,分子变〔2〕大,难于渗透,沉淀在原纤维表面形成表面过鞣,造成粒面粗糙。而阳离子油可以与胶原原纤维表面的活性基团暂时结合在原纤维表面形成一层薄膜,暂时封闭胶原分子的活性基因,起到阻止和延缓铬络物与胶原原纤维表面分子结合的作用,并且乳化了的阳离子油还具有一定的分散作用,能防止铬络离子的聚集长大,从而有利于铬鞣剂进入到原纤维内部。阳离子油除具有上述

6、作用外,还具有稳定胶原羧基的空间构型,使其处于易于铬结〔3〕合的特殊取向,提高了原纤维内部铬鞣剂的存留量。因此,适当的阳离子油预处理,可使羧基含量减少,提高生物组织的稳定性。通过对牛心包片材进行理化特性和化学性能的研究结果证实:一组的各项指标都优于二组。生物瓣的寿命不单是化学问题,还与力学因素、生理、病理、生化等各学科密切相关。本研究就体外疲劳模拟试验后的组织进行了初步探讨。虽然体外加速疲劳试验具有省时、省力、省费用等优点,但极难体现体内疲劳失效的特点,而且与体内试验的相关性也很差。我们预测,用戊二醛、阳离子油预处理,三氧化二铬复鞣的牛心包瓣会减少钙化,减少应力破坏,延长使

7、用寿命。耐久性还有待我们去研究。参考文献1王福熙,等1牛心包人造瓣膜远期失效与超微结构之关系1中华胸心血管外科杂志,1990,6(2):652李建民,等1鞣制条件对铬鞣剂在皮革胶原纤维中的渗透影响1皮革科技,1988(4):123斯特拉霍夫等,著1皮革的染整1张廷有,王照临译1成都:成都科技大学出版社,1989,11HISTOLOGICALSTUDYINCHROMICOXIDE-TREATEDBOVINEPERICARDIALBIOPROSTHESISVALVEWITHELECTRONMICROSCOPYAFTER

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