课题3 酵母细胞的固定化

课题3 酵母细胞的固定化

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1、课题3酵母细胞的固定化清溪中学陈华毅一、课题目标2.尝试制备固定化酵母细胞,并利用固定化酵母细胞进行酒精发酵。1.说出固定化酶和固定化细胞的作用和原理。基础知识(一)固定化酶的应用实例1.利用固定化酶技术生产高果糖浆的实例(1)高果糖浆的生产需要酶葡萄糖异构(2)葡萄糖异构酶的优点稳定性好、可以持续发挥作用(3)在生产中直接使用酶有什么缺点?酶溶解于葡萄糖溶液后,无法回收,造成浪费2.固定化酶的反应柱示意图3.固定化酶在生产实践中的优点反应柱能连续使用半年,大大降低了生产成本,提高了果糖的产量和质量。(二)固定化细胞技术1.将酶或细胞固定化的方法将酶(或细胞)包埋在细微网格里将酶(或细

2、胞)相互连接起来将酶(或细胞)吸附在载体表面上包埋法化学结合法吸附法2.固定化酶和固定化细胞的联系与区别联系:应用相同,都能催化某些反应区别1)固定化细胞技术操作容易,成本低,容易回收;2)固定化细胞技术对酶活性影响更小;3)固定化细胞固定的一系列酶;4)由于大分子难以通过细胞膜,因此固定化细胞的应用有一定的限制;3.固定化酶和固定化细胞常用的载体材料明胶、琼脂糖、海藻酸钠、醋酸纤维素和聚丙烯酰胺等,其共同的特点是不溶于水的多孔性载体(一)制备固定化酵母细胞实验操作1、酵母细胞的活化2、配制物质的量浓度为0.05mol/L的CaCl23、配制海藻酸钠的溶液4、海藻酸钠溶液与酵母细胞混合

3、5、固定化酵母细胞(二)用固定化酵母细胞发酵实验操作1、将固定化的酵母细胞(凝胶珠)用蒸馏水冲洗2到3次。2、将150ml质量分数为10%的葡萄糖溶液转移到200ml的锥形瓶中,再加入固定好的酵母细胞,置于25摄氏度下发酵24h。在缺水的状态下,微生物会处于休眠状态。活化就是让处于休眠状态的微生物重新恢复正常的生活状态。酵母细胞所需要的活化时间较短,一般需要0.5~1h,教师需要提前做好准备。此外,酵母细胞活化时体积会变大,因此活化前应该选择体积足够大的容器,以避免酵母细胞的活化液溢出容器外。(一)酵母细胞的活化实验操作过程中要注意的下列问题(二)加热使海藻酸钠溶化是操作中最重要的一环

4、,涉及到实验的成败,教师一定要提醒学生按照教材的提示进行操作。海藻酸钠的浓度涉及到固定化细胞的质量。如果海藻酸钠浓度过高,将很难形成凝胶珠;如果浓度过低,形成的凝胶珠所包埋的酵母细胞的数目少,影响实验效果。(三)刚形成的凝胶珠应在CaCl2溶液中浸泡一段时间,以便形成稳定的结构。检验凝胶珠的质量是否合格,可以使用下列方法。一是用镊子夹起一个凝胶珠放在实验桌上用手挤压,如果凝胶珠不容易破裂,没有液体流出,就表明凝胶珠的制作成功。二是在实验桌上用力摔打凝胶珠,如果凝胶珠很容易弹起,也能表明制备的凝胶珠是成功的。

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