GBT5009.86-2003 蔬菜、水果及其制品中总抗坏血酸的测定（荧光法和2，4-二硝基苯肼法）.pdf

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1、67.040ICCS5中华人民共和国国家标准GB/T5009.86-2003代替GB/T12392-1990蔬菜、水果及其制品中总抗坏血酸的测定(荧光法和2,4一二硝基苯脐法)Determinationoftotalascorbicacidinfruits,vegetablesandderivedproducts-Flourometricmethodandcolorimetricmethod2003-08-11发布2004-01-01实施中中华人民共和国卫生部发布国国家标准化管理委员会GB/T5009.86-2003前言本标准第一法对应于ISO6557-1:1986((蔬菜、水果及其

2、制品中抗坏血酸的测定方法》和AOAC967.22《维生素制品中总维生素C的微量荧光测定方法》本标准与ISO6557-1和AOAC967.22的一致性程度为非等效。本标准代替GB/T12392-1990((蔬菜、水果及其制品中总抗坏血酸的测定方法(荧光法和2,4一二硝基苯麟法)》。本标准与GB/T12392一工99。相比主要修改如下:—修改了标准的中文名称，标准中文名称改为《蔬菜、水果及其制品中总抗坏血酸的测定(荧光法和2,4一二硝基苯阱法)》;—按GB/T20001.4-2001《标准编写规则第4部分:化学分析方法》对原标准的结构进行了修改。本标准由中华人民共和国卫生部提出并归口。本

3、标准由中国预防医学科学院营养与食品卫生研究所负责起草本标准主要起草人:王光亚、杨晓莉、田立新。原标准于1990年首次发布，本次为第一次修订GB/T5009.86-2003蔬菜、水果及其制品中总抗坏血酸的测定(荧光法和2,4一二硝基苯麟法)范围本标准规定了用荧光法和2,4一二硝基苯阱比色法测定食品中的抗坏血酸。本标准适用于蔬菜、水果及其制品中总抗坏血酸的测定。本方法检出限:荧光法为。.022pg/mI=2,4一二硝基苯麟比色法为0.1pg/mi。线性范围:荧光法为5pg/mL-20pg/mL,2,4一二硝基苯脐比色法为1pg/mL^-12Ieg/mLo第一法荧光法2原理试样中还原型抗坏

4、血酸经活性炭氧化为脱氢抗坏血酸后，与邻苯二胺(OPDA)反应生成有荧光的喳唔琳(gainoxaline)，其荧光强度与抗坏血酸的浓度在一定条件下成正比，以此测定食品中抗坏血酸和脱氢抗坏血酸的总量。脱氢抗坏血酸与硼酸可形成复合物而不与OPDA反应，以此排除试样中荧光杂质产生的干扰。3试剂3.1偏磷酸一乙酸液:称取15g偏磷酸，加人40mL冰乙酸及250mL水，加温，搅拌，使之逐渐溶解，冷却后加水至500mL。于4℃冰箱可保存7d--10d.3.20.15mol/L硫酸:取10mL硫酸，小心加人水中，再加水稀释至1200ml-.3.3偏磷酸一乙酸一硫酸液:以0.15mol/I硫酸液为稀释

5、液，其余同3.1配制。3.4乙酸钠溶液(500g/L):称取500g乙酸钠(CH3000Na·3H,O)，加水至1000ml。3.5硼酸一乙酸钠溶液:称取3g硼酸，溶于100MI一乙酸钠溶液(3.4)中。临用前配制。3.6邻苯二胺溶液(200mg/L):称取20mg邻苯二胺，临用前用水稀释至100mL,3.7抗坏血酸标准溶液(1mg/mL)(临用前配制):准确称取50mg抗坏血酸，用偏磷酸一乙酸溶液(3.1)溶于50mL容量瓶中，并稀释至刻度。3.8抗坏血酸标准使用液(100pg/mL):取10mL抗坏血酸标准液，用偏磷酸一乙酸溶液稀释至100mL，定容前试pH值，如其pH>2.2时

6、，则应用偏磷酸一乙酸一硫酸溶液(3.3)稀释3.90.04%百里酚蓝指示剂溶液:称取。.1g百里酚蓝，加。.02mol/I氢氧化钠溶液，在玻璃研钵中研磨至溶解，氢氧化钠的用量约为10.75mL，磨溶后用水稀释至250mL.变色范围:pH值等于1.2红色pH值等于2.S黄色pH值大于4蓝色3.10活性炭的活化:加200g炭粉于II盐酸(1+9)中，加热回流1h^-2h，过滤，用水洗至滤液中无铁离子为止，置于1100C--120℃烘箱中干燥，备用。4仪器4.1实验室常用设备GB/T5009.86-20034.2荧光分光光度计或具有350nm及430nm波长的荧光计。4.3捣碎机。5分析步

7、骤5.1试样的制备称取100g鲜样，加100mL偏磷酸一乙酸溶液(3.1)，倒人捣碎机内打成匀浆，用百里酚蓝指示剂调试匀浆酸碱度。如呈红色，即可用偏磷酸一乙酸溶液稀释，若呈黄色或蓝色，则用偏磷酸一乙酸一硫酸溶液稀释，使其pH为1.2。均浆的取量需根据试样中抗坏血酸的含量而定。当试样液含量在40pg/mL^-100pg/ml一之间，一般取20g匀浆，用偏磷酸一乙酸溶液稀释至100mL，过滤，滤液备用。5.2测定5.2.1氧化处理:分别取试样滤液(5.1)及标