鸡肉中己烯雌酚残留量的hplc法测定研究

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1、鸡肉中己烯雌酚残留量的HPLC法测定研究马纪伟南阳医学高等专科学校,河南南阳473058摘要:旧的]建立鸡肉屮己烯雌酚残留量的高效液相色谱测定方法。[方法]用乙醇萃取鸡肉中的己烯雌酚残留,采用固相萃取柱(SPE),甲醇一水(10+90)2mL淋洗,甲醇2mL洗脱,收集洗脱液浓缩蒸干,再用「卩醇溶解残渣,用紫外检测器高效液相色谱仪,在波K:280nm处检测,并使用外标法定量。[结果]平均回收率可达到72.2%以上,最低检测浓度10ug/kgo[结论」本研究建立的高效液和色谱测定鸡肉中己烯雌酚残留量的方法与其它方法相比貝-有操作简便、快速、精密度高、回收率高、重现性较好

2、,检测限低等优点。关键词:己烯雌酚;高效液相色谱;残留;鸡肉DeterminationofDESinChickenbyHPLCMAJi-WciYANDong-LiangNANYANGMedicalCollege,Nanyang473058,HeNanAbstract:ThispaperistoestablishahighlysensitivemethodfordeterminationofresiduesdiethylstilbestrolinChickenbyhighperformanceliquidchromatography.Diethylstilbestro

3、linsamplewasfirstextractedwithethanohthenpassedthroughaSPE一C

4、gcolumn,rinsedwith2mLofmethanol一H2O(10+90)andeluatedwith2mLofmethanohandfinallydeterminedbyHPLCwithaUVdetectoratawavelengthof280nm.Itwasfoundthatthelowestlimitofdetectionwas10ug/kg,therecoveriesrateofdetectedsampleswereover72

5、.2%.Itwasconcludedthatthismethodisspecific,accurate,reproduciblefordeterminationofdiethylstilbestrolresiduesinChickenwithhighperformanceliquidchromatography.Keywords:diethylstilbestrol;highperformanceliquidchromatography;residues;Chicken己烯雌酚(Diethylstibestrol,DES)是人工合成雌激素,最早用于牛、羊促增肉剂,能

6、增加食欲和氮的储留,促进蛋口质的合成,具有增加蛋白质沉积和减少脂肪沉积的作川[1]o许多国家将其加入到动物饲料中,以提高家禽家畜的饲养效率。但己烯雌酚等人工合成的雌激素长期食用易致儿童性早熟、生氏发育迟缓,男了女性化,女性易发生乳腺癌、卵巢癌等⑵。因此,这类物质在肉类中的积存,严重地威胁着人类的健康。美国从1979年开始禁止将其作为动物饲料添加剂,欧盟已禁止将同类激素川于食品动物中,并限制进口其他国家川使丿IJ过该药的动物牛产的食品巴本研究建立的鸡肉屮己烯雌酚残留的HPLC检测方法,操作简便、快速、准确、灵敏度高,重现性好,适合大批量样站的测定。1材料与方法1.1仪

7、器及试剂口木岛津公司LC-6A高效液相色谱仪(配SPD—6A紫外检测器);高速冷冻离心机(德国HERMLE公司制造);旋转蒸发仪461(美国Waters公司生产);旋涡式混合仪XW-8()A(上海医科大学仪器厂制造);己烯雌酚对照品,纯度I>99%(Sigma公司),甲醇(色谱纯)、乙醇(色谱纯)、乙精(色谱纯)(美国Fisher公司).1.2标准储备液的配制:精密称取己烯雌酚标准品10mg,置1OOmL容虽瓶中,用卬酸溶解,并稀释到刻度,混匀.即得己烯雌酚标准储备液,浓度为O.lOmg/mLo1.3标准工作液的配制:精密量取己烯雌酚储备液2mL,置lOOmL容量瓶

8、中,用甲醇稀释至刻度,摇匀,即得标准中间溶液,浓度为2ug/mLo精密量取luL,2uL,5uL,10UL,25UL标准屮间液,分别用甲醇稀释定容至lOOmL,即得系列标准工作液,浓度分别为0.02□琴/mL,0.04Mg/mL,0」ug/mL,0.2ug/mL,0.5Pg/mL®1.4样品的制备:収适量鸡肉丁•搅肉器中搅成肉糜状,称HZ5.00g均匀试样,置50mL离心管中,加乙醇20mL,在涡流混匀器上剧烈混合成匀浆,超声萃取20mino置振荡器中振荡5min,离心10min(4000r/min)o用尖嘴吸液管将上清液转入至蒸发瓶。残渣加乙醇20mL,在涡流

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