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1、齐齐哈尔大学毕业设计（论文）题目两部培养法对柴胡培养物屮柴胡皂甘产量的影响学院生命科学与农林专业班级生物科学081学生姓名宋淑云指导教师张东向成绩2012年6月18摘要木次实验研究的主要对象是柴胡愈伤组织，对于该愈伤组织的生长速度以及它的代谢产物含量的影响因素有很多。比如，生长素在一定浓度范围内可以促进细胞生长，超过某浓度也可以抑制细胞生长。细胞分裂素可以促进细胞分裂。氮源的比例都会愈伤组织的生长和其代谢产物的含量有影响。基于以上条件，进行了此次研究。通过两步培养法，MS基木培养基的基础上降低培养基中的氮源的比例，激素的
2、比例，在培养基的设计过程中，也采用了均匀设计法。每隔一定时间测定柴胡愈伤组织鲜重，以此做了该愈伤组织鲜重的生长曲线。在柴胡皂昔提取及测定过程中，采取了超声法提取皂昔，用紫外分光光度法测定它的吸收值。最后，运用公式计算出柴胡皂昔的含量。经比较，证明第二步培养中的冇两中培养基培养基的皂昔含量高于第一步培养中的。其中差值较高的培养基的组成是其中NH4+:N03比值为40:5时,2,4-D的浓度是0.15mg/L、6-BA的浓度是2.5mg/L,其它因素与MS培养基中的一致。关键词：三岛柴胡；愈伤组织；生长曲线；均匀设计；两步培
3、养AbstractThetargetofthisexperiencewastheThefumatorycallus.Thereweremanyfactorsineffectingthegrowingspeedofthecallusanditscontentofthemetabolin.Forexample,therightdensitycanpromotethegrowingofcells,butbeyondthevalue,itwouldblockthegrowing.Cytokinincanpromotethegro
4、wingofcells.Theproportionofnitrogensourcecanalsoeffectthegrowingofthecallusandthecontentofthemetabolin.Theauthor'stworesearcheswerebasedontheaboveconditions.Bytwo-stepmethod,lowertheproportionofnitrogensourceandhormone.andintheprocess,theauthoralsouseuniformdesig
5、n.Weighingthenetweighteveryasuitableminutes,whichwasthebasementofthegrowthcurveofthecallus'snetweigh匸.intheprocessofextractionandmeasuringofSaikosaponin,theauthorusesultrasonicmethod,andultravioletspectrophotometrytomeasureitsabsorptionvalue.Atlast,caculatingthec
6、ontentoftheSaikosaponinbyformula.Bycomparing,itprovesthatthecontentofthesaponininthesecondstep^stwomediumswasmorethaninthefirststep.TheformofthehigherdifferencevaluemediumisNH4+:NO3=40:5,theconcentrationof2,4・Dwas0」5mg/L>theconcentrationof6-BAwas.5mg/L,theotherfa
7、ctorswerethesameastheMS.Keywords:Bupleurumfalcatum,callus,growthcurve,uniformdesign,twotraining.目录摘要IAbstractII目录I第1章绪论11.1柴胡简介11.1.1柴胡的药理作用11.1.2化学成分21.1.3研究现状21.2植物组织培养技术21.2.1愈伤组织31.3均匀设计31.4两步培养法31.4.1两步培养法的运用42.1实验材料52.1.1供试材料52.1.2培养基52.2实验主要试剂62.3实验设计62.4实
8、验方法72.4.1注意事项：72.4.2柴胡愈伤组织的接种72.4.3愈伤组织的鲜重测量72.5生长曲线的制作82.6含水量的测定92.6.1提取步骤102.7标准曲线的制备102.8柴胡总皂苜的测定112.9第二步培养法112.9.1柴胡愈伤组织鲜重测定13第3章结果分析143.1直观分析143.2结果讨论17第4
