组培实验室常见消毒方法优劣比较

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1、组培实验室常见消毒方法优劣比较组培实验室是生命科学及相关学科实验室建设中必备的实验室。组培实验室的消毒是实验室日常管理工作的重要环节,直接关系着组培实验的成功与否和组培幼苗的质量高低。组培实验室的消毒一般又可分为环境消毒、培养基消毒和外植体的消毒。培养基的消毒主要是在高压灭菌锅中进行,在此不再赘述。环境消毒和外植体的消毒则有多种方法,这些方法各有优劣,使用不当时还会对人体产生伤害,为此,笔者特对这些典型方法进行分析比较,为组培实验室的科学管理提供一些参考。1 组培实验室的环境消毒  保持组培实验室的空气清洁度是减少组培污染的重要条件,用于实验室消毒的常规消毒方

2、法包括紫外线照射法、甲醛熏蒸法、新洁尔灭(苯扎溴铵溶液)法等,比较新的方法有中草药消毒法。1.1 紫外线照射法  紫外线是波长在10-400nm之间辐射光的总称,能引起细菌、病毒等微生物遗传物质的结构发生变化,从而影响DNA复制、RNA转录和蛋白质的翻译,导致病菌或病毒死亡。此外,紫外线辐射所产生的臭氧和各种自由基可损伤蛋白质和酶分子,导致功能改变。紫外线消毒具有广谱性,可杀灭细菌、病毒、真菌、支原体等各种微生物。紫外消毒具有较高的杀菌效率,且由于未使用化学药剂,消毒过程中不会产生对人体和环境有害的副产物。该技术运行维护简单,费用较低。采用室内悬吊式紫外线消毒

3、时,室内安装紫外消毒灯的数量为每平方不少于1.5W,照射时间不少于30min。但需要指出的是,过量的紫外线照射对人体有一定的危害乃至致癌作用。紫外线作用于中枢神经系统,可出现头痛、头晕、体温升高等症状。过量辐射会诱发皮肤癌。紫外辐射对眼睛的损伤特别明显,严重时可能诱发白内障。因此,当组培实验室在用紫外消毒期间,工作人员不要呆在正消毒的空间内,切忌用眼睛注视紫外灯。特别的,如超净工作台内的紫外灯打开消毒时,应避免将手长时间暴漏于紫外灯下。  一般在接种室用紫外线消毒后,不要立即进入接种室,此时室内充满高浓度的臭氧,会对人体,尤其是呼吸系统造成伤害。应在关闭紫外线

4、灯15-20min后再进入室内。1.2 甲醛熏蒸法  甲醛是一种无色且具有强烈刺激性的气体,可与蛋白中的氨基结合使其变性或使蛋白质分子烷基化,对细菌、真菌、病毒等均有效,可广谱杀菌,且效率较高。在实际操作中,经常采用甲醛溶液和高锰酸钾按2∶1的比例进行薰蒸消毒,即甲醛(40%)10ml/m3,高锰酸钾5g/m3。KMnO4具有强氧化性,与甲醛发生反应,产生大量热量,使甲醛以气体形式挥发,扩散于空气和物体表面,消毒时间一般为20-30min。但甲醛本身对人体来说,也是一种有害物质。皮肤直接接触甲醛可引起过敏性皮炎,产生色斑。吸入高浓度甲醛,可诱发过敏性哮喘。高浓

5、度甲醛还是一种基因毒性物质,实验动物在实验室高浓度吸入的情况下,可引起鼻咽肿瘤。长期呼吸含有高浓度甲醛的空气还会使妇女月经紊乱,影响生育,并引起新生儿体质下降与染色体异常。特别地,当室内甲醛严重超标时还会引发白血病,导致死亡。为此,用该法消毒时,应注意:消毒时,工作人员须佩戴口罩、手套;消毒容器离门的距离要近一些,以便消毒人员迅速撤离;熏蒸前要密闭空间,一经开始,所有人员必须马上离开;消毒容器应选用耐腐蚀的陶瓷容器,容器容积比药液量至少大4倍,以免药液沸腾时溢出;消毒期间,不可进入消毒空间;消毒后通风换气,等气味散尽后再出入;药液次序要正确,先将水倒入容器内,

6、然后加入高锰酸钾,均匀搅拌,再加入福尔马林,切忌将福尔马林中加入高锰酸钾,以免福尔马林溅出,造成危险。1.3 新洁尔灭(苯扎溴铵溶液)  新洁尔灭(苯扎溴铵溶液)为十二烷基二甲基苄基溴化铵,是一种阳离子表面活性剂。这类消毒剂可吸咐在细菌的表面,从而改变细菌细胞壁和细胞膜的透性,使菌体内的酶、辅酶和代谢产物漏出,妨碍细菌的呼吸及糖酵解过程,并使菌体蛋白变性。此类消毒剂具有杀菌力强,无腐蚀性及漂白性,易溶于水等特点。新洁尔灭消毒时一般按照1∶1000进行稀释,如果瓶装的新洁尔灭已稀释,按1∶500配置即可。具体使用时,可参照使用配比参数正确使用,但不能在使用时与肥

7、皂液混合,以防失去药效。新洁尔灭在酸性、中性介质中杀菌力强。对结核杆菌、绿脓杆菌、芽胞、真菌和病毒效用差,甚至无效。基本而言,新洁尔灭对人体的毒害较低,目前还没有致癌和致畸的报道。但应注意,重复或长期接触本品,有可能对心血管系统、消化系统、特别是生殖系统造成伤害。此外,过敏体质接触可能发生过敏反应。因此,在用新洁尔灭进行喷洒消毒时,依然要注意戴好手套和口罩。1.4 艾叶和苍术熏蒸  艾叶为菊科植物艾的干燥叶,是临床常用中药之一。药理研究表明,艾叶水煎液和艾叶油有抗细菌和真菌作用。苍术亦为菊科植物,中药学上认为其有抗溃疡、抗炎、抗腹泻等作用。艾叶和苍术混用,对组

8、培室进行熏蒸,是一种新型的空气灭菌方式

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