越桔的组织培养及杜鹃类菌根真菌对越桔组培苗的生理效应研究

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1、越桔的组织培养及杜鹃类菌根真菌对越桔组培苗的生理效应研究陈爱美【摘要】：越桔属(Vaccinium)植物分布广泛，从热带一玄到北极圈都有，在我国集屮分布于西南几省。越桔(Vacciniaceae)是一种果药兼用的植物，含有人虽对人类健康有益的物质，包括：抗氧化物，糅酸，叶酸，抗菌成分，丰富的食用纤维等。越桔喜生于微酸性土壤屮，有些为酸性土壤指示植物。我国土壤屮酸性土而积人而种类多，酸性土总而积在2亿hm-2以上。除去砖红壤和赤红壤等不适宜发展的地区以外，适栽土壤区域不少于1亿hm-20由于许多作物对酸性土壤的适应局限性，这些区域大多数在经济上比

2、较贫困落后，开发的潜力相当人。组织培养技术可以在短期内生产出人量的优质苗木，而试管苗成木高低是商品化冇苗工厂的决定因素，降低试管苗成木是提高匸厂化冇苗经济效益的关键途径。而组培苗驯化成活率低，成活示移栽到田间生长势弱。越桔根系呈纤维状，没有根毛，但在白然状态下，越桔根系与菌根真菌共生形成杜鹃类菌根(Bicoidmycorrhiza.EM)OEM在促进植物生长、提高养分吸收率、生态系统养分循环及保护植物抵御不良环境胁迫屮起关键作用。木论文从越桔纟fl织培养的应用研究出发，以兔眼越桔(VacciniumasheiReade)栽培品种园蓝(Garde

3、nblue)为主要试材，针对越桔在纟fl织培养中使用的玉米素价格昂贵，用量人，组培苗驯化成活率低等问题。用价格比较低廉，分裂素活性比较强的TDZ宋代替ZT,对培养基进行了简化研究。并从缙云山上十年生以上的越桔属村i物乌饭H(Vaccinium.sprengeliiSleumer)根系上分离菌根真菌，对越桔组培苗进行了接种，研究杜鹃类菌根(EM)对组培M的生理效应。一、彫响兔眼越桔初代培养的因素研究试验结果表明：在初代培养中，用0.1%的升汞消毒外植体6〜8min最为适宜。兔眼越桔西南农业人学硕I学位论文摘要春季取材腋芽的诱导率都比秋季取材的高，

4、而且诱导出的芽长势也较好。春秋季萌生出的根状装的萌芽率比钱尖和茎段的萌芽率高，诱导培养基改良wPM附加5.omg・L—'玉米素明显提高了芽的一秀导率，并且所诱导出的腋芽长势较强'影响兔眼越桔继代培养的因素研究在继代培养屮，我们对影响增殖系数的基木培养基种类，激素种类及浓度，琼脂用量，蔗糖用量，pH值和继代周期进行了研究。结果表明:改良wpM培养基显著促进了越桔组培苗的增殖。激素是影响增殖的关键因了，我们以改良WPM培养基为基木培养基，对激素ZT、TDZ、GA3、6—BA同时进行了筛选，试验结果表明:TOZ对增殖系数的影响极显著优于ZT、GA;、

5、'BA,平均增殖系数可达到7。改良wPM培养基附加Tozo:mg・L-'+GA31.omg・L一，+IAAO.2mg・L—'为增殖培养基的最优组合。不同的蔗糖处理对增殖系数的影响差界不显著，最优增殖培养基附加蔗糖209・u'的处理其平均增殖系数略大些，在生长中的表现也比较好。不同琼脂用量对增殖系数的彫响也没有显著并异，但培养基中附加7g・t■I琼脂，组培苗的平均增殖系数最人。pH值对增殖系数的彫响差异显著，其屮以pH值5.5的处理影响最显著，这与越桔的喜酸特性是相吻介的。不同继代周期对增殖系数的影响羌异极其显著，以4周为一个继代周期，其增殖系数

6、最高，周期也比较短，转接时组培苗的生长势述比较强，若周期太长，培养基会板结开裂，成木也会升高。影响兔眼越桔叶片不定芽诱导率的因素研究我们对无菌苗的叶片进行了诱导培养，以改良WPM为基木培养基，试验结果表明:暗处理对叶片不定芽的诱导率存在显著斧异，其中暗处理20天叶片不定芽的诱导率最高。TDZ0.05mg'『可诱导出大屋的叶片不定芽，并且不经愈伤阶段，不定芽直接从叶片上分化出。四、兔眼越桔培养基简化的研究分别用白砂糖、自来水、琼脂条代替蔗糖、蒸锚水、琼脂粉，对培养基进行了简化研究，试验结果表明:儿种简化培养基对增殖系数的影啊差异不显著，其中以简化

7、培养基改良wPM+白砂糖209・1_一'+琼脂条8g・L一'+H来水效果最好。五:兔眼越桔组培苗的生根研究由于木木植物组培苗生根比较困难，我们同时采用瓶内生根和瓶外生根两种方法，对越桔组培苗进行诱导生根，试验结果表明:1/2改良wPM+NAAO.5mg・1_一，的处理生根率最高，门J达68.98%,遮光处理20天可明显提高组培苗的瓶内生根率，生根率町高达82、18%。激素速蘸处理以NAA1000mg・L—'可使瓶外打插苗生根，但生根率只有17.95%。生根苗基部基本没有愈伤出现，较瓶内生根苗的须根略粗，颜色嫩白，根数鮫多。西南农业人学硕I学位论

8、文摘耍六:杜鹃类菌根真菌对越桔组培苗的生理效应研究我们对重庆络云山十年生以上的乌饭树根系上的新土根进行检测，并把含有菌丝体的土样接种到生根的越桔组培苗