ATP检测技术培训课件

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1、——评价医疗器械清洗效果北京创新世纪生化科技发展有限公司ATP生物荧光检测技术器械清洗的目的：降低器械上微生物负荷；去除器械上的有机物和无机物；控制包装区的污染，达到环境标准要求；确保灭菌达到无菌保障水平（SAV）10-6ATP检测示意图残留污染物细菌细胞中含有ATP有机污染物中含有ATP＋O2萤光素酶荧光素反应发光细菌含ATP有机物残留清洗质量是保证灭菌成功的前提降低微生物负荷：去除大多数微生物后，再进行消毒和灭菌，才能有效的达到消毒灭菌效果；去除微生物滋生的条件，阻碍残留的微生物繁殖（有机物、温度）

2、减少热源的产生（革兰氏阴性杆菌灭活后，细胞壁释放的内毒素）深度清洁监测中ATP生物荧光法更全面消毒不合格清洁不合格培养法：不合格ATP法：不合格↑↑培养法：合格ATP法：不合格↑培养法：合格ATP法：合格清洁不合格消毒合格、清洁合格有效去除残留的有机物可阻断微生物滋生环境清洗质量是保证灭菌成功的前提去除有机物或杂质：覆盖在器械上的有机物或无机物，灭菌剂不易穿透，有效的保护了细菌芽孢的灭活。使用中脱落在病人的体内（转移其他病人），可引起脏器粘连和伤口内感染，甚至危及病人生命。ATP存在于细胞内ATP（三磷

3、酸腺苷）存在于动物细胞、细菌细胞、植物细胞中，同类活细胞内的含量基本一致；体细胞ATP含量大约为1×10-15molATP；细菌细胞中ATP含量大约为2×10-18molATP；细胞在自然凋亡的情况下，ATP含量会有所变化；因此可通过ATP的残留量，直接反映清洁的效果。技术原理沾染在物体表面、医疗器械上的血液、组织液等体液中含有大量的体细胞和细菌等污染物，这些生物污染可以通过ATP生物荧光法测出。萤光素酶在Mg2＋、ATP、O2的参与下进行酶促反应放出光子仪器定量测定加入ATP标准品前后的相对发光值RL

4、U，从而获知污染物中的ATP含量，来判断医疗器械的污染程度和清洗效果。通过使用体细胞ATP消除技术，也可对残留细菌进行检测。ATP的可重复性实验以细菌内ATP为指示物，取105大肠埃希菌（ATCC8099）菌悬液50μL，加入无菌离心管中进行ATP含量测定并用菌落计数法对照；上述试验重复三天，每天同一管菌液重复测十次；将每天测的次数与ATP含量之间的关系进行曲线标定。菌落总数（CFU）第一天1.78×104第二天1.23×104第三天1.88×104中国CDC消毒检测中心ATP生物荧光法与细菌计数法的相

5、关性研究金黄色葡萄球菌（ATCC6538）测定结果：菌落计数相对光单位CFULog(CFU)RLULog（RLU）2.79×1088.4545829016.662.78×1077.4423217006.372.76×1066.446999315.852.81×1055.45810964.912.75×1044.4481603.912.82×1033.459852.992.82×1022.451762.252.75×101.441202.08表中cfu和RLU值均为5次试验结果平均值。中国消毒学杂志100

6、1-7658（2008）03-0245-0448小时5秒y=1.3199x-0.8317R2=0.97780.001.002.003.004.005.006.007.008.009.000.001.002.003.004.005.006.007.00relativelightunit(Log10)colonyformingunit(Log10)金黄色葡萄球菌菌落数对数值与RLU对数值的线性关系中国CDC消毒检测中心ATP生物荧光法与血液残留的相关性研究对不同稀释度血液的RLU观察：血液稀释度相对光单位稀

7、释度Log(倍数)RLULog（RLU）1.0×10-2-252977566.721.0×10-3-328780836.461.0×10-4-46065645.781.0×10-5-5738074.875.0×10-6-5.3351734.552.5×10-6-5.6194844.291.0×10-6-682073.911.0×10-7-711813.071.0×10-8-82872.461.0×10-9-91792.25中国消毒学杂志1001-7658（2008）03-0245-04血液稀释倍数对数值

8、与RLU对数值的线性关系型号：BT-112D仪器灵敏度：10-18molatp用途：器械表面洁净度、微生物检测、水质检测等型号：PLUS仪器灵敏度：10-15molatp用途：物表洁净度及手卫生产品介绍微生物检测试剂盒表面、管腔采样器100ul水质采样器ATP技术检测的使用方法1、取出拭子，涂抹器械表面（采样面积：按照管理规范的要求）2、取样后放回试管、掰断阀芯3、挤下试剂并振荡4、放入仪器内检测仪器检测时间5秒钟涂抹2掰断阀芯3挤入试剂5