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1、1、测体长2、双侧附睾、双侧肾周围脂肪组织3、取肝脏和肾脏。肝脏分装6份4、取血：尽量多取（血清山油三酯（TG）,血清总胆固醇（TC）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL一C）、低密度脂蛋片胆固醇（LDL—C）、极低密度脂蛋白胆固醇（VLDL—C）,血尿酸）1.2.2取血样从造模开始算，第12周末当晚大鼠禁仅不禁水16h,次日上午称朿后，经眼眶静脉取血0.5mL,血样4C静置2h后，3000nnp离心10min,分离血清，分装EP管，-20-C保存。1.2.3血清TC含量测定按试剂盒说明书操作。1.2.4
2、血清TG含量测定按试剂盒说明书操作。5、1.2.2取材从造模开始算,第12周末当晚大鼠禁食"不禁水16h,次曰I：午称重后，用戊巴比妥钠仃mg/kg）腹腔注射麻醉，固定大鼠，打开腹腔，采用贞空采血管腹主动脉取血。（黑米糙米皮对大鼠脂代谢的影响及其分子机制研究_徐惠龙.caj）1.2.2取样从造模开始算，第12周末当晚大鼠禁仪不禁水16h,次日上午称匝后，用戊巴比妥钠（1mg/kg）腹腔注射麻醉，固定大鼠,打开腹腔,采用真空采血管腹主动脉取血,迅速取肝脏、心脏、主动脉、附睾和肾周处的脂肪垫等。血样代
3、静置2h后，3000nnp离心10min,分离血清，分装EP管，立即进行肝功能检测。1.2.3肝脏人体形态、肝和脂肪指数计算观察肝脏色泽、体枳、切口等大体形态结构，并用数码相机进行拍摄。迅速摘取大鼠整个肝脏及附睾周围脂肪，在冰冷的生理盐水中漂洗，滤纸拭干，电子天平称重、记录，计算肝、脂肪指数。（2株乳酸杆菌对高脂饮食人鼠脂肪分布及胰岛素一瘦素水平的影响一王菁.caj）(3)过氧化物酶增殖物激活受体丫(PPAR*)PPAR是细胞核内僦体激素受体，可被过氧化物酶增殖剂(PP)激活。同其它核内受体一样,
4、PPAR也是配体激活转录因子,体内多种脂肪酸及其代谢产物可激活PPAR。活化的PPAR通过与位于某些基因上游的特异DNA反应元件(PPRE)结合,调控基因表达oPPRE基因存在于UCP家族、脂肪辅酶A氧化酶等基因中。PPAR有3个亚型a、8.丫，分别在不同组织表达。在人类PPAR-a主要与肝内脂■类代谢及免疫反应有关。PPAR-y主要在脂肪及免疫系统表达，与脂肪平衡、诱导多种组织细胞脂肪细胞分化及胰岛素有关。PPAR・y有2种异构体PPAR-yl及PPAR-y2，其中PPAR*2高浓度表达于脂肪组
5、织㈣，与肥胖关系密切。PPAR-Y2的第115位氨基酸发生改变，导致PPAR・丫持续激活，加速脂肪细胞分化，患者表现为严重肥胖，但不伴有奇胰岛素血症。人骨骼肌中的PPAR-y表达主要受胰岛素所控制,在伴有高胰岛素血症肥胖或2型糖尿病患者中表达上调，PPAR-ymRNA水平与BMI及空腹胰岛素浓度呈正相关。GATA・2和GATA・3存在于白色脂肪组织,可调节PPAR・y2启动基因，并抑制前脂肪细胞转化为脂肪细胞【卯。(4)PPAR・y转录共激活因子(PGC-1)*许多生物功能的实现与转录因子有关。目
6、前PGC・】作为一个共转彖因子家族，在肥胖、糖尿病、心肌炎等疾病中调节代谢及保持糖、脂和能量平衡的作用是一个研究热点。这些研究也为发展新的疾病治疗手段提供了新的靶点。PGC-1是PPAR・y的共转录激活因子，在细胞整体循坏代谢中起到信号调节作用。其中最主要的是调节线粒体代谢和保持糖、脂和能量代谢的平衡。PGC-1有两个亚基：a和卩o其中PGC-la是在褐色脂肪中发现与PPAR有相互作用。PGC-1可与许多不同的转录因子相互作用，从而在不同的组织中发挥不同的作用。PGC-1可以通过配体结合方式与核受
7、体家族成员结合，如与PPAR・y结合可以促进UCP1的产生。此外PGC・1还可以与核外受体家族结合执行功能，如与SREBP结合促进脂肪和脂蛋白的生成、与F0X01结合增加糖异生卩2】°最近报道有关于PGC-la缺失的小鼠其线粒体相关基因表达减少.褐色脂肪中PGC-1是褐色脂肪细胞分化必不可少的分子，是控制适应性产热相关蛋白产生的分子开关，它可以促进能量摄入，线粒体脂肪酸氧化、UCP1诱导的能量产生卩叭同时发现冷坏境可以促进PGC-1的表达，而当PGC・1缺失时，小鼠对冷的耐受能力急剧下降，这可能是
8、由于损伤了线粒体中脂肪酸氧化和电子转运的功能，同时伴随UCP1表达量的减少，同样的结果在人体内也有发现⑴】o此外，PGC-1过量表达不仅可以诱导UCP1表达量的增加而且能促进白色脂肪向褐色脂肪的分化"均。另外Rodger教授发现Sirtl和PGC・1有相互作用：饥饿时的营养信号可激活肝脏中Sirtl蛋白，此时Sirtl使PGC-1去乙酰化后与其相互作用达到调节糖异生作用，而不影响PGC-1对线粒体的作用W(3)葡萄糖转运子-4(GLUT-4)GLUT-4对胰的素敏感。可将胞外葡萄糖
