石斛多糖提取工艺的研究

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1、石斛多糖提取工艺的研究［摘耍］冃的:对石斛多糖提取工艺进行优化。方法：比较不同浸提温度、时间和除蛋白方法对多糖得率的影响，优化工艺。结果:石斛多糖最佳提取工艺条件为90°C水浸提3〜4h,料水体积比为1：50,采用Sevag法脱蛋白，样品-Sevag溶液=1：1、氯仿-正丁醇二10：2.5,提取吋间为30min。结论:此方法提取石斛多糖得率高，为理想的提取条件。［关键词］石斛;多糖;捉取工艺［中图分类号］R284.2［文献标识码］A［文章编号］1673-7210(2010)04(c)-040-03ExtractiontechnologyofpolysaccharideinDend

2、robiumCHENRui(MedicalPromotionProfession,GuangzhouVocationalCollegeofScienceandTechnology,Guangzhou510550,China)［Abstract］Objective:Tostudyoptimumextracted-conditionsofpolysaccharideinDenderobiun.Methods:Themostyieldofpolysaccharidewasgottenwhichvolumeratioofdendrobiumtowater,distillingtemper

3、aturetheandmethodofisolatingproteinwereused.Results:Theeffectswasbestwhenvolumeratioofdendrobiumtowaterwas1:50,distillingat90°Cfor3-4hours,isolatingproteinbysevegmethodinthemixturecomposedof50%samp1eand50%sevagsolution,theratioofchloroformandn-butanowas10：2.5,theextractiontechnologywas30min.C

4、one1usion:Theextractionmethodisperfectbecausethemostyieldofpolysacchareideisgotten.［Keywords］Dendrobium;Polysaccharide;Extractiontechnology石斛属植物具有很高的药用价值。而多糖类成分是石斛小具有免疫增强作用［1］和抗肿瘤作用⑵的活性成分，常以多糖的含量高低来判断石斛药材质量的高低。本研究对石斛多糖的提取工艺进行优化探讨，为其工业化生产和利用提供理论基础。1仪器与试药1.1仪器仪器设备冇ESJ120-4型万分Z—天平，电热恒温水浴锅,RE-52A

5、型旋转蒸发器,755B型紫外可见分光光度计。1.2试药石斛(四川乐山市歇马乡，经成都屮医药人学严铸云教授鉴定为细茎石斛)洗净杀青后于60°C烘干，粉碎，过50目筛备用。本实验所用试剂均为分析纯。2方法与结果2.1提取工艺［3-5］取石斛粗粉约50g,加入石油瞇(60〜90C)250ml,回流提取1h,脱脂，过滤，挥干溶剂,加入80%乙醇250ml,回流提取1h,过滤,挥干溶剂，加入蒸镭水浸提2次,趁热过滤,减压浓缩至150ml,0.1%活性炭脱色，过滤，脱蛋白，加入95%乙醇使溶液含醇为80%,于冰箱屮静置过夜,沉淀物用无水乙醇、丙酮、乙储依次洗涤，烘干，得石斛多糖粗制品。2.2

6、加水量的选择原料与水体积比分别为1：20、1：30、1:40、1：50、1:60,比较其多糖得率。2.3浸提温度的选择分别在80、85、90、100°C条件下浸提3〜4h,比较其多糖得率。2.4蛋白去除方法的选择本实验运用Sevag法、TCA法［5-6］去除石斛多糖中的蛋白质。2.4.1Sevag法多糖提取液，真空抽滤，浓缩至一定体积,按比例加入氯仿-正丁醇混合液,剧烈振荡，以5000r/min的转速离心15min,取上清液。如此反复操作3次。为取得最佳的实验效果,对提取条件设计了正交试验［7］,因索水平见表1。表1Sevag法脱蛋白正交设计Tab.1Factorsandthei

7、rlevelsoftheSevagmethod2.4.2TCA法多糖提取液，以5000r/min的转速离心15min,取上清液,加入草酸调整pH至pH二7,加入适量3%的TCA,沉淀蛋白质，调整pH至pH二7,放置过夜，以5000r/min的转速离心15min,取上清液。如此反复操作3次，取平均值。2.5粗多糖含量的测定方法运用苯酚硫酸比色法［8］进行米11多糖含量测定。2.6结果2.6.1不同加水体积对石斛多糖得率的影响见图1。2.6.2不同浸提温度对石斛多糖得率的影响见图2。