浅谈胚胎分割

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1、浅谈胚胎分割“实验动物育种学”课程论文浅谈胚胎分割姓名:罗均学号:81070724院系:畜牧兽医学院专业:动物医学指导教师:丁瑜俞先锋高妍张嘉保二0—0年十月浅谈胚胎分割罗均丁瑜命先锋高妍张嘉保(吉林大学畜牧兽医学院,长春130062)摘要:胚胎分割是研究细胞分化、早期胚胎发育、胚胎细胞全能性的有力手段,木文对胚胎分削的研究进展、技术方法及具相关问题进行阐述,综述国内外哺乳动物胚胎分割的当前水平和今后发展趋势。关键字:胚胎分割胚胎移植半胚显微操作SuperficialtalkonEmbryoBisectionLuoJunDingYuYuXianfengGaoYan

2、ZhangJiabao(CollegeofAnimalScienceandVeterinaryMedicine,,JilinUniversity,Changchun130062)Abstract:Embryobisectionisapowerfulmeansinthestudyofcelldifferentiation,earlyembryonicdevelopmentandthetotipotencyofembryocell.Thepapersummarizedtheresearchprogresses,technology,somemethodsandothe

3、rrelatedprobleminembryodissection•Andalsoaticallyreviewedthepresentlevelsanddevelopingtendencyinfutureonthetechniqueforbisection(separation)ofmammalianembryossthomeandabroad.Keywords:EmbryoBisectionEmbryotmsferhalfembryosMicromanipulation1、胚胎分割概述:1.1、胚胎分割是将一枚胚胎用显微手术的方法分割成二分、四分甚至八分胚,经体

4、内或体外培养,然后移植入受体中,以得到同卵双生或同卵多生后代。1.2、胚胎分割发展历程:哺乳动物胚胎分割和卵裂球技术始于Nicholas(1942)对人鼠2-细胞胚胎卵裂球的分离和培养研究。其后,Tarkowski[1]研究了小鼠1/4、2/4、3/4卵裂球的发育规律,得到了世界上首例半胚来源的活体动物。Willadscn用琼脂包埋分割的绵羊2、4、8-细胞期胚胎,使半胚在屮间受体内发育时受到保护,并防止其内的卵裂球分散,取得了近似正常的妊娠率(66%)。此后,动物胚胎分割技术迅速发展起来,并在上世纪80年代中后期达到了一个高潮。到冃前为止,牛、羊、猪、小鼠、灵长

5、类等哺乳动物不同时期的分割胚都已生出后代【2】。1.3.胚胎分割应用领域:胚胎分割技术在发育遗传学、生理学、生殖调控及生产实践上有着多方而的应用。在遗传学屮通过胚胎分割町以得到遗传上同质的后代,以研究在遗传背景完全相同的情况下,环境因素对个体发育的影响。在对动物进行生殖调控时通过胚胎分割,可增加移植胚胎的数量,捉高家畜产量,捉高优良品种的推广速度。在药理研究中利用胚胎分割得到挛牛:子进行研究可大大降低因个体差异而造成的误差,等等。2、胚胎分割原理:早期实验胚胎学的研究发现,人多数哺乳动物的胚胎发育是调整发育,即去掉一个早期胚胎的一半,剩余的部分可以调整其发育方向,

6、仍可以发育为一个完整的胚胎。反Z,若把两个早期胚胎融合在一起,它们不是发育为两个连在一起的胚胎,而是在细胞间垂新调整,仍发育为-•个胚胎。但随着发育进程,其调整能力逐渐减弱,细胞的组织发育方向变得越来越固定,直到调整能力完全丧失。早期的实验胚胎学证明哺乳动物2细胞期的每个卵裂球都具有发育为正估胎儿的“全能性”。对小鼠胚胎分割的实验认为,在32细胞期的胚胎仍具有调整能力,但到64细胞期的胚胎就逐渐失去这种能力。到神经轴时期的胚胎,再分割为两半,就永远不会发育为正常的胚胎了【3】。3、胚胎分割的方法:3.1毛细管吹吸法:这种方法主要适用于分离2-细胞到8-细胞期卵裂球

7、。在显微操作仪的帮助下,在无钙、镁离子的培养液中用固泄针吸住胚胎,用另一玻璃针挑开胚胎的透明带,细胞团口透明带中脱出。再用仅能通过胚胎的毛细管吹吸胚胎,得到单个卵裂球,再将卵裂球装入空的透明带中,体外培养至一左时期,移植入受体中【4】。3.2£[接分割法:胚胎透明带不经任何处理,用显微手术刀或玻璃针将整个胚胎分割为二。该方法多用于晚期桑柩胚或胚泡期的胚胎分割。在显微操作仪的帮助下,以固肚针吸住坯胎,用玻璃针或显微手术刀将胚胎対称切割。在切割桑棋胚时,需要在不含钙、镁离子的培养液屮,以降低细胞间的连接,降低由于切割造成的损伤。对胚胎的分割要注意对称,尤其是喪胚,耍注

8、意将内细胞

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