生物选修3人教新课标12基因工程的基本操作程序

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1、普通高小课程标准实验教科书一一生物选修3［人教版］「2基因工程的基本操作程序【学习目标】了解基因工程的基本操作程序的知识点，并能在相对简单的情境屮识别和使用它们。【知识要点】1.名词：基因、基因文库、基因组文库、cDNA、转化、PCR、表达载体、启动子、标记基因、基因探针、感受态细胞2.基因工程基木操作程序的“四步曲”及获取目的基因的方法3.PCR扩增过程、DNA分子杂交技术及基因表达载体的组成4.将目的基因导入植物细胞、动物细胞、微生物细胞的常用方法5.目的基因的检测与鉴定G］学习方法木节课学生以预习为

2、主通过课堂讨论达到学习目标。1课前预习1【基本知识梳理】基因工程的基括：目的基因:从（一）、目的基因的获取方法＜［基因文库：中获取基因组文库IcDNA文库PCR：是_项DNA片段的核酸合成技术。利用扩增目的基因«目的：原理.过程目的：使在受体细胞中稳定存在，并可以（二）、基因表达载体的构建（使。（基因工程的核心）基因表达载体的组成：1•启动子：是--段有特殊结构的，位于基因的,是识别和结合的部位，能驱动基因,最终获得所需的02.终止子：也是一段有特殊结构的，位于基因的o3.标记基因的作用：；常用的标记基

3、因是。「导入植物细胞的方法：(三)、将目的基因导入受体细胞方法：3导入动物细胞的方法：I导入微生物的方法：1.将目的基因导入植物细胞的方法：a农杆菌转化法(1)农杆菌特点：(2)原理：(3)适用范围：b基因枪法(1)适用范围(2)缺点:C一一我国科学家独创的一种方法举例：2.将目的基因导入动物细胞(1)方法：(2)受体细胞是,原因是而将目的基因导入植物细胞时，受体细胞从理论上说既可以是,又可以是—基因导入微生物细胞(1)思考：早期基因工程为什么选用原核生物作为受体细胞？(2)应用最为广泛的受体细胞是(3)

4、过程：首先用处理细胞，使细胞处于一种的生理状态，这种细胞称为；第二步是将溶于与感受态细胞混合，在一定的下促进感受态细胞吸收DNA分子，完成转化过程。碑测转基因生物的染色体上是否插入了目的基因/检测方法：DNA探针+转基因生物D7A』检测目的基因是否转录方法：(DNAI探针+转基因生物mRNA)(四)、目的基因的检测和鉴定［I检测目的基因是否翻译方法：I鉴定：对生物进行水平的鉴定。1.思考：①导入目的基因后需要检测哪些方面？各采取什么方法？②什么是DNA分子探针？检测时的DNA探针通过什么原理来检测目的基因

5、和相应的mRNA?③利用抗体一抗原杂交检测的原理是什么？2.H的基因能否在真核生物中稳定遗传的关键是3.检测指的是水平，鉴定指的是水平。【知识整合】1.基因工程的步骤：日的基因的获得基因表达载体的构建将日的基因导入受体细胞冃的基因的检测与鉴定律总规结2.知识清单目的基因的获取方法目的基因：指编码蛋白质结构基因「基因文库基因申文库部分乘因文库从基因文库中获取化学方法人工合成PCK：是一项在生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术。利用PCR技术扩增目的基因目的：获取大量的目的基因原理：DNA复制J过程基因表

6、达载体的构建（基因工程的核心）目的：使目的基因在受体细胞屮稳定存在，并可以遗传给下一代，并使目的基因能够表达和发挥作用。基因表达载体的组成:r目的基因：V启动子：I终止子：J标记基因：「转化：目的基因进入受体细胞内并在受体细胞内维持稳定和表达的过程将目的基因导入受体细胞丫r导入植物细胞的方法〉方法：v•农杆菌转化法基因枪法.花粉通道法显微注射技术目的基因的检测和鉴泄导入动物细胞的方法：J导入微生物的方法：（检测转基因牛物的染色体上是否插入了目的基因方法：分子杂交技术（DNA探针+转基因生物DNA）I检测目

7、的基因是否转录「检测j方法：分子杂交技术（DNA探针+转基因生物mRNA）检测目的基因是否翻译成蛋白质I方法：抗原一抗体杂交1鉴定：对生物进行个体水平的鉴定3.DNA文库与基因组文库的比较文库类型cDNA文库基因组文库文库大小小大基因中启动子（具有启动作用的D7A片段）无有基因中内含子（位于编码蛋白质序列内的非编码DNA片段）无有基因多少某种生物的部分基因某种生物的全部基因物种1'可的基因交流可以部分基因可以4.法则及基因工程中有关酶的比较作用作用及作用部位解旋酶DNA复制及转录吋打开DNA双链碱基对间的

8、盘键，解开双螺旋RNA聚合酶DNA转录时与RNA聚合酶结合位点结合，启动RNA转录，并将一个个核糖核背酸连接起来DNA聚合酶DNA复制时以DNA母链为模板，将一个个脱氧核昔酸连接起來，形成3,5-磷酸二酯键，形成新子链，其作用在于连接单个脱氧核苜酸限制性内切酶提取日的基因及运载体切割时专一性地识别特定的脫氧核营酸序列，并在特定的切点切断3,5-磷酸二酯键DNA连接酶形成重组DNA时可将目的基因与运载体连接起來，重建被限制酶切开