遗传论文范文

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1、遗传论文范文卵母细胞孤雌激活方法研究进展摘要:卵母细胞孤雌激活和孤雌发育的研究对于提高细胞核移植率、胚胎体外生产率均具有重耍的意义和价值。本文对哺乳动物卵母细胞孤雌激活机制、激活方法及激活效果的影响因素等作了简单的综述和总结。关键词:卵母细胞;超数排卵;孤雌激活ABSTRACT:Theresearchingofocyteparthenoactivationandparthenogeneticisveryvaluableandimportantonimprovingtheratioofnucleartransplantationandembryoi

2、nvitroproduct!on.Theacrticlebrieflysummarizethemechanismandmethodsofmammalocyteparthenoactivationalsotheinfluencingfactorsrelatedtotheactivationresults.KEYWORDS:Oocyte;Superovulation;Parthenoactivation卵母细胞只冇激活后才能完成成熟分裂,并由此向有丝分裂过渡,开始新的个体发生。卵母细胞激活是哺乳动物生殖过程中的重要生理现象,无论是正常受精还是克隆,卵

3、母细胞均发生激活或人工激活。对哺乳动物卵母细胞孤雌激活的研究,将加深对胚胎发生、核移植等许多重大理论问题的认识。孤雌激活的成功,对野生动物保护、转基因动物制作以及生物发育机制的深入研究等也具有着重要的理论及现实意义[l]o孤雌胚的发育可以只有单性动物参与。1970年,Graham[2]首次获得了小鼠的孤雌激活囊胚;2003年,Kent等⑶从猴子的孤雌激活囊胚中成功地分离出了胚胎干细胞(Embryonicstemcells,ES细胞),并且分离出的ES细胞端粒酶及碱性磷酸酶(Alkalinephosphatase,AKP)活性检测为阳性,表达Oct

4、24(octamer2bindingtranscriptionfactor4),SSEA24(stagespecificembryonicantigen24),TRA1260(tumorrejectionantigen1260)和TRA1281(tumorrejectionantigen1281)O2004年,TomohiroKono等[4]对孤雌激活的小鼠囊胚进行了移植,成功地诞生出世界首例孤雌激活小鼠,同时也是世界上首例通过孤雌牛殖而诞牛的哺乳类动物,从而证实孤雌牛殖胚胎能够发育成个体。卵母细胞激活是受精能否正常进行的一个关键环节,研究表明即

5、使采用ICSI辅助受精也只能获得70%左右的正常受精率,其中卵母细胞激活不足是主耍原因[5]。对卵母细胞孤雌激活的研究不但有助于分析卵母细胞受精失败的原因,更重要的是寻找一种符合生理条件的卵母细胞辅助激活方法.1•卵母细胞激活机制在自然情况下,多数哺乳动物排出的卵母细胞是次级卵母细胞,并停留在第二次减数分裂中期,受精并得到精子的激活后才恢复其内源过程,完成第二次减数分裂,排出第二极体并过渡到第一次卵裂。已证实,体内排出的卵母细胞停滞在Mil期是由于持续高水平的成熟促进因子MPF和细胞静止因子CSF所致。不同的物理或化学方法对卵母细胞激活效果是不同

6、的,但其激活机理基本是一致的,不同激活方法的终结冃的均是耍将停止在Mil阶段的卵母细胞恢复分裂周期,这就必须使胞内的MPF和CSF的活性降低或消失。MPF的活性是由对钙离子非常敏感的CSF来维持,CSF的作用是抑制停滞于Mil期卵母细胞内的cyclinB的降解。卵母细胞受精或人工激活后,细胞内钙离子浓度迅速增加,使CSF的活性消失,cyclinB被降解,从而引起MPF的活性降低或消失,细胞离开M期,完成减数分裂并进行卵裂。抑制卵内游离钙离子浓度的升高则抑制了卵母细胞激活的一系列反应,钙离子浓度的升高是卵母细胞激活的重要诱导信号,正常受精时,Mil

7、卵母细胞有一半的染色质以第二极体形式排出,而在孤雌激活时,由于不同刺激因子、刺激强度以及实验条件的影响,有些卵母细胞第二极体不能排出,因而孤雌激活卵或孤雌激活胚胎核型也会不一致,通过对各种刺激因子的配伍应用可以得到各种不同倍体的孤雌激活胚胎。不同激活方案诱导卵母细胞发生激活的类型不同,可能是由于刺激作用于卵母细胞微管、微丝及有丝分裂器的方式和程度不同,而导致第二次减数分裂过程的改变[6]。2.卵母细胞激活方法2.1物理激活方法物理激活方法中,机械刺激和温度刺激,因其操作繁琐,稳定性和重复性差,且孤雌激活率偏低,较少被人们采用。相对而言,电刺激激活

8、方法因简便易行、稳定性、重复性较好,且集激活和融合为一体,而被广泛应用。卵母细胞受电刺激时,细胞膜形成许多恢复的微孔,钙离子可通过微孔进

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