基于ITS2序列的积雪草及其混伪品的分子鉴定

《基于ITS2序列的积雪草及其混伪品的分子鉴定》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、基于ITS2序列的积雪草及其混伪品的分子鉴定陈晓辰I，陈倩2,韩建萍I(1.屮国医学科学院，北京协和医学院药用植物研究所，北京100193；2.湖北中医药大学，武汉430061)摘要：冃的快速准确的鉴别中药积雪草及其混伪品。方法采用1TS2序列片段，对其进行PCR扩增、测序，运用CodonCodeAligner.MEGA4.1等软件进行序列拼接和分析，构建积雪草及其混伪品的NJ树。应用Koetschan等建立的ITS2数据库及其网站预测ITS2二级结构。结果积雪草及其混伪品ITS2序列之间存在明显差异，种间遗传距离大于种内遗传距离，不同积雪

2、草样品在NJ树上独立聚为一支。结论运用ITS2序列可以准确鉴定积雪草及其伪品。关键词：积雪草；ITS2；混伪品；分子鉴定中图分类号：R282.5MolecularidentiHcationofCentellaasiaticaanditsadulterantsusingITS2DNAbarcodeCHENXiaochem,CHENQiam,HANJianpingi(1.PlantDevelopment,ChineseAcademyofMedicalSciences,PekingUnionMedicalCollege,Beijing100193

3、;2.HuibeiUnivercityofChineseMedicine,WuHan430061)Abstract:ObjectiveToidentifyCentellaasiaticaanditsadulterantsinafastandspecificway.Methods1TS2regionsasDNABarcodewereamplifiedandsequensed・SequenceassemblyandconsensussequencegenerationwereperformedusingtheCodonCodeAligner.S

4、equeneeanalyseswerecarriedoutbyMEGA4.1.Thephylogenetictreewasconstructedusingtheneighbor-joiningandKimura2-parametermethods.ResultsAsignificantdifferencewasobservedintheITS2sequencesbetweenCentellaasiaticaanditsadulterants・In"r・specificgeneticdistanceishigherthanintra-spec

5、ificone，ITS2sequencesandsecondarystructureofITS2candistinguishCentellaasiaticafromitsadulterants・ConclusionITS2canserveasavaluablemarkerforidentifyingCentellaasiaticaanditsadulterants・Keywords:Centellaasiatica;ITS2;adulterants;molecularidentification0引言积雪草为伞形科植物积雪草(Centell

6、aasiatica)的干燥全草。具有清热利湿、解毒消肿的作用，临床上主要用于治疗湿热黄疸、屮暑腹泻、石淋血淋、痈肿疮毒、跌扑损伤⑴。文献已报道过的混伪品主要有天胡荽(HydrocotylesibthorpioidesLam),连钱草(Glechomalongituba(Nakai)Kupr.),过路黄(LysimachiachristinaeHance),马蹄金(DichondrarepensForst)等目前已有文献报道的鉴别积雪草及其混伪品的方法主要有性状鉴别、显微鉴别、导数紫外吸收光谱法、差热分析法等4一幕DNA条形码是指用短的、标准

7、的DNA片段作为物种标记而建立的一种新的生物鉴定方法。ITS2序列作为条形码序列之一，以其序列片段较短，物种水平变异较快等优势被广泛应用于药用植物及生药鉴定15⑹。本文选取ITS2序列鉴定积雪草及其混伪品，以期为临床用基金项高等学校博士学科点专项科研基金(200800231066)作者简介：陈晓辰，(1988・)，女，硕士研究生，中药资源学。通信联系人：韩建萍，(I977-),女，副硏究员，中药资源学。E-mail:jphan@implad.ac.cn幼安全提供可靠保障。1材料与方法1.1材料表1研究所用材料信息表拉丁学名Latinname

8、标木号SpecimenNO.登录号拉丁学名Latinname标本号登录号C.asiaticaPS1212MT01GQ434697C.asiaticaPS1212MT04GQ434