托布津降解菌的分离筛选及鉴定

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1、毕业论文题目:托布津降解菌的分离筛选及鉴定学院:牛命科学学院专业:生物科学毕业年限:2013年学生姓名:李亮亮学号:200974010121指导教师:张爱梅托布津降解菌的分离筛选及鉴定李亮亮指导老师:张爱梅(西北师范大学生命科学学院,甘肃兰州730070)摘要:于2013年9月采集兰州交通大学后山的一•处样地土壤,此土壤为长期施用过甲基托布津的蔬菜种植大棚土壤,从中分离纯化岀能够降解甲基托布津的菌株1株,并对其进行形态观察及牛理生化鉴定后,初步确定该菌株屈于葡萄球菌屈{Hafniasp.)。关键词:细菌;托布津降解菌;分离;鉴定Theseparationandidentifi

2、cationofbacteriafordegradingthiophanateLiLiangliang(CollegeofLifeScience,NorthwestNormalUniversity,Lanzhou730070)Abstract:ThesoilwascollectedinSeptember2013whichwereusedthiophanatelong-term・TheplotswerecultivatedvegetableandlocatedonthehillbehindLanzhouJiaotonguniversity.Theonestrainwasisol

3、atedfromthesoilsample.Thestraincandegradethiophanate.Themorphologicalwasobservedandthephysiologicalandbiochemicaltestwerecarriedout.ThestrainbelongstoHafniasp.Keywords:bacteria;degradingthiophanatebacteria;separation;identification人类从20世纪40年代起开始使用农药除虫除草,每年挽冋农业总产量15%左右的损失。但是,长期大量农药的使用,使环境屮的有

4、害物质大大增加,危害到生态和人类健康。据报道,农药利用率一般为10%,约90%残留在环境屮,造成对环境的污染。甲基托布津(Topsin・M)是一种广谱性内吸低毒杀菌剂,通用名称是甲基硫菌灵(thiophanate-methyl),化学名称是1,2■二(3■甲氧碳基2硫JR基)苯,CAS号为23564-05-8,结构式如图1所示。甲基硫菌灵属于苯并咪卩坐类,纯品为无色结晶,原粉(含量约93%)为微黄色结晶。比重1.5(20°C),熔点172°C,蒸汽压949.1xlO8Pa(25°C),儿乎不溶于水,可溶于丙酮、甲醇、乙醇、氯仿等有机溶剂,对酸、碱稳定山。OH^CO时-OCH3

5、so图1「卩基托布津的分子结构式Figimildolhancmolecularstructuralformula甲基托布津(Topsin-M)最初是由日木曹达株式会社研制开发出来的。能够有效防治多种作物的病害,如用于小麦、水稻、甘薯、瓜类、番茄、桑树、苹果树、禾谷类、油菜、菜花、甜菜、蔬菜、马铃薯、葡萄、烟草、柑桔树、毛竹、花生、兰花等防治多种病害,其内吸性比多菌灵强。甲基托布津按英化学结构属取代苯类杀菌剂,被植物吸收后即转化为多菌灵,它主要干扰病菌菌丝形成,影响病菌细胞分裂,使细胞壁中毒,砲子萌发长出的芽管畸形,从而杀死病菌,残效期5至7天。主要用于叶面喷雾,也可用于土壤处

6、理。虽然甲基托布津是一种低毒杀菌剂,它既能防治农林病虫害,也会对人畜产生危害,形成农药污染,并且已经发现了多起屮毒事件。关于植物源性食品屮甲基托布津残留量的检测方法,1=1前有气相色谱法,紫外分光光度法,气相色谱法,采用木方法对某菜市场交易的植物源性食品样品进行检测,总计检测了38批植物源性样品,包括玉米、黄瓜、青椒、西兰花等品种,结果有2批样品检测出甲基托布津的残留量分别为11.0mg/Kg.9.2mg/Kgo并且,经呼吸道及皮肤吸收甲基托布津而致急性中毒的事件也早有发生,咪吐类农药慢性中毒时,引起倦乏、头疼、食欲不振、肝脏损害等叫甲基托布津还能使铜离子在土壤上的表观吸附量

7、増加⑶。甲基托布津与某些金属离子可以形成不溶性络合物,导致一些金属离子的缺乏,影响植物的生长,随着分子生物学的飞速发展,随着研究的不断深入,利用微生物降解农药等环境污染物,保护环境不久将会变成现实。人类从20世纪40年代起开始使用农药除虫除草,每年挽凹农业总产量15%左右的损失。但是,长期大量农药的使用,使环境屮的有害物质大大增加,危害到生态和人类,形成农药污染。据报道,农药利用率一般为10%,约90%残留在坏境中,造成对环境的污染叫我国是农业大国,化学农药的使用量全球第一,据统计,我国每年农药使用面积

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