细胞凋亡论文

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1、深圳大学生命科学学院创新实验论文□基础生物学创新实验1.0学分课程名称：□细胞与遗传学创新实验1.0学分□生化与分子生物学创新实验□生物科学1.0学分□生物技术1・5学分实验项目来源：□创新实验课程指定实验项目□课外科技创新实验项目：资助单位项目编号实验项目名称:凋亡细胞的诱导和7实验项目学分：05姓名:指导教师:专业：生物技术学号二实验时间:2011年12月1日星期论文提交时间：2011年12月17日星期六牛•物科学教学实验屮心制深圳大学生命科学学院创新实验论文评分表评价方面权重评分平时表现：（包括实验态度

2、、实验室常识、实验习惯、实验技能、原始记录等方面）20分实验方案设计：（包括开展本项实验研究的理论基础、研究目的、技术路线、研究方法、实验进度安排、可行性分析等。）20分论文：（严格按照正规期刊要求的格式撰写论文。主要评价指标：是否按照科学的研究方法完成实验，实验结果是否翔实、充足，论文撰写是否规范，分析讨论是否合理到位。）60分合计100分指导老师签字：生物科学教学实验屮心制盐胁迫诱导的植物细胞凋亡摘要：以洋葱内表皮细胞为材料，分别以O.lmol/L0.6mol/Ll.lmol/L的NaCl溶液处理2,4,

3、6h后进行染色观察，以此来发现植物细胞在高盐环境下的抗逆性，并H观察细胞凋亡的典型特征。关键词：碱性纤维素酶产生菌；分离；筛选；牛长曲线细胞凋亡或细胞程序性死亡是多细胞牛物甚至单细胞牛物体在内外因子的诱导下,山基因控制的一种细胞主动性死亡途径，是细胞生命活动的基本特征之一。近年來研究表明，植物的一些特定细胞除在止常牛长发育的特定期间能发牛细胞凋亡外，还能受理化或牛物等因子所诱导发生类似细胞凋亡的典型形态和生化特征。⑴木实验旨在研究不同NaCl浓度对细胞凋亡的影响。盐胁迫是植物的一种重要抗逆反应，对植物的牛长具

4、有重要的牛理意义。盐浓度达一定值时，会破坏细胞的正常生命活动，部分细胞甚至死亡。⑴高盐胁迫下的洋葱内表皮细胞死亡也具有细胞凋亡典型的形态和牛化特征。细胞凋亡主要形态学特征有：细胞膜完整，细胞连接和微绒毛消失，细胞骨架紊乱，粘着力降低，单个细胞与临近细胞脱离；核纤层蛋口降解，染色质凝集和边缘化，裂解为碎块，细胞核最终裂解为市核膜包裹的碎块,细胞器展木保持完整，细胞皱缩,细胞膜收缩并内陷，将细胞自行分割为多个具有膜包围、内含各种细胞成分的凋亡小体。凋亡细胞不会发生细胞膜、溶酶体等膜结构的破裂，不会引起细胞内容物外

5、溢细胞凋亡可通过形态学观察鉴定：改良苯酚品红染色观察，可观察细胞核、染色体的形态，从而判断细胞是否凋亡。1材料与方法1.1实验材料普通洋葱1个1.2实验试剂1.2.1改良苯酚品红染液：95%乙醇、1%醋酸、Na2HPO4、Na2HPO4、l%NaOH溶液、1%HC1、廿油、苏木精、彼矶、碘酸钠（NaIO3）、冰醋酸、Hanks染液、丙醇、二甲苯、中性甲醛1.2.2NaCl诱导溶液：0」mol/L：0.2922gNaC1定容至50ml0.6mol/L：1.7532gNaC1定容至50ml1.1mol/L：3.2

6、142gNaC1定容至50ml1.3实验预处理取新鲜洋葱于室温下清水培养4小吋，使其活化1.4细胞诱导凋亡1.4.1鳞茎切取30cm2左右的内表皮，任取1进行观察记录1.4.2将切片分成5组，每组6片，其中1、2组为对照组，1组放入去离子水中不做其他处理，2组则放入试管中煮沸5mino3-5组为实验组，依次放入装有lmol/L.0.6mol/L.1.lmol/L浓度的NaCl溶液的培养皿中。1.4.3进行实验处理后的2h、4h、6h在各组中任取一片做改良苯酚品红的染色观察并记录。2结果与分析2.1诱导前染色观

7、察结果细胞膜完整,细胞核呈球形，染色均匀，细胞质均匀透明，从细胞核倚靠边缘对推断液泡依然完整。400X1000X图1诱导前改良苯酚品红染色观察图2.2煮沸的细胞观察结果细胞坏死,细胞膜破碎，细胞核破裂，内容物外溢。400X1000X图2经煮沸处理细胞改良苯酚品红染色观察图2.3诱导2h后的观察结果2.3.1去离子水（图3）：与诱导处理前大致相同，细胞膜完整,细胞核呈球形，染色均匀，细胞质均匀透明,从细胞核倚靠边缘对推断液泡依然完整。400X1000X图32h去离子水改良苯酚品红染色观察图2.3.20.1mol

8、/L（图4）：部分细胞出现轻度质壁分离，部分细胞核有轻微皱缩°400X1000X图42h0.1mol/L改良苯酚品红染色观察图2.3.30.6mol/L（图5）：质樂分离较为明显，细胞膜皱缩，细胞核内出现泡状结构。400X1000X图52h0.6mol/L改良苯酚品红染色观察图2.3.2l.lmol/L（图6）：质壁分离明显，细胞核明显皱缩，染色质与细胞质包裹在一起形成较多的凋亡小体400X1000