组培获得马铃薯脱毒苗的概要 11

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1、沈阳农业大学编号（学号）：13484021生物技术专题论文（2013届本科）学院：生物科学技术学院专业：生物技术（1班）学号：13484021姓名：陈智刚完成日期：2012年1月5日沈阳农业大学组培获得马铃薯脱毒苗的概要摘要：脱除病毒是植物组织培养深入探讨研究中的一个技术难题。本文简要介绍植物组织培养的基本原理和方法，以马铃薯为例，重点介绍了利用热处理加茎尖组织培养法获得马铃薯脱毒苗的具体技术方法，脱毒率可达100%。同时还对植物组织培养脱毒快繁技术的应用前景作了分析。关键词：茎尖培养，组织培养，快繁脱毒技术，病毒

2、检测，应用前景1植物组织培养研究概况1.1研究简史自从1943年怀特（White）提出植物细胞“全能性”（Totipotency）学说及诸多后学者（Steward，1958，Guha和Marteshwari，1964）相继证实后，引发植物组织和细胞培养快繁技术的勃然兴起。我国的专家学者在20世纪70年代后也在此领域做了大量的研究和开发工作，创造了很多新方法、新技术，提出不少新成果，开拓了植物组织培养快繁技术的新局面[1]。目前采用组织培养脱病毒快繁及离体快繁生产株苗的技术已发展相当成熟[2]。脱毒株苗具有无杂菌、适

3、应能力较强、繁育较快、质量优、抗性好、分蘖性强、繁殖系数高、大批量生产、周年供应、便于运输等优点，已得到有关专家的鉴定及高度评价和种植试验区、种植产区果农的认可。例如脱毒马铃薯、脱毒红薯、脱毒生姜、脱毒大蒜、脱毒草莓、脱毒苗木、脱毒花卉等等，已成为现代农民致富的新宠[3]。1.2植物组织培养和脱毒快繁的定义植物组织培养（Planttissueculture）是指在无菌的条件下，将离体的植物（根、茎、叶、花、果实、种子等）、组织（形成层、花药组织、胚乳、皮层等）、细胞（体细胞和生殖细胞）以及原生质体，培养在人工配制的

4、培养基上，给予适当的培养条件，使其长成完整的植株。由于培养物是脱离植物母体，在玻璃瓶中进行培养，所以也叫做离体培养。其完整过程是：沈阳农业大学脱分化再分化生长根茎叶外植体愈伤组织生长点或完整植株发生胚状体在有些情况下，再分化也可不经愈伤组织阶段，而直接发生于脱分化的细胞[1]。植物组织培养脱毒快繁是人工在无菌条件下利用植物体的一部分，在人工控制的营养和环境条件下繁殖植物，脱除病毒得到无毒苗株，继而在大田快速繁殖的技术。脱毒及离体快繁，这是目前植物组织培养应用最多、最广泛和是有效的一个方面。主要是进行茎尖培养脱除病毒

5、。对于脱毒苗、新育成、新引进、稀缺良种、优良单株、濒危植物和基因工程植株等可通过离体快速繁殖，同时可不受地区和气候的影响，比传统的繁殖方法快数万倍。植物组织培养已发展成为一门富有生命力的学科。追究植物组织培养脱毒快繁技术的发展简史，在11世纪就出现的热处理脱毒法，最早解决一些作物的病毒病害问题[5]。本世纪50年代发展的植物组织培养技术为脱毒提供了一条有效途径。现在植物的脱毒技术有多种，其中应用最广泛的有三种：热处理法、茎尖培养脱毒法、抗病毒药剂法，将不同的方法相结合起来应用效果更好。它们的脱毒原理各不相同。2马铃

6、薯组织培养脱毒快繁技术鉴于当前农业经济作物生产上苗木（主要是无性繁殖作物）存在着严重病毒累积、品种退化、产量和品质大幅度的下降等问题，探索一种脱毒效果好、繁殖系数高、简易且经济的繁育良种及健苗技术，是当前农业经济作物种苗木生产中急需研究和探讨的课题。下面通过以马铃薯为例，进行热处理加茎尖培养结合病毒检测法获得脱毒苗的方法，简述植物组织培养脱毒快繁技术的应用。2.1研究简史马铃薯在种植过程中易感染病毒，当条件适合时，就会在植株体内增殖，转运和积累于所结薯块中，并且世代传递，逐年加重[4]。病毒的增殖与植物正常代谢极为

7、密切，目前尚没有发现既能杀死病毒又不损伤植物的药剂，病毒危害一度成为马铃薯的不治之症。1953年Nirris将孔雀石绿（Malachitegreen）加入培养基中抑制病毒繁殖，并通过茎尖组织培养，获得青山（Greenmountain）品种无PVX（马铃薯X沈阳农业大学病毒）的马铃薯植株。此后，通过茎尖组织培养获得无病毒植株的技术迅速发展，为解决马铃薯病毒危害提供了有效途径，为生产提供优良种薯。目前，国际上用茎尖培养产生的马铃薯品种已达150个左右[1]。科学研究结果证明，侵染马铃薯的病毒有20多种。这些病毒一旦侵入

8、马铃薯植株和块茎，就会引起马铃薯退化，出现各种各样的病态，造成不同程度的减产。研究的结果还证明，病毒在植物组织中分布是不均匀的，并且受一定环境条件影响，在靠近马铃薯茎的顶端病毒浓度很低或不含病毒。根据这一特点，通过茎尖培养可以获得马铃薯无病毒苗[5]。另外，马铃薯病毒，有的对温度比较敏感，有的不敏感，但对植株或发芽的块茎进行高温处理后再作茎尖培养，一般脱毒率