自制鳗弧菌卵黄抗体抑菌效果研究【毕业设计】

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1、本科毕业设计（20__届）自制鳗弧菌卵黄抗体抑菌效果研究33目录1引言42试验材料及仪器42.1试验材料42.2试验仪器53试验方法53.1菌株处理53.2体外抑菌实验53.3体内抑菌实验64实验结果与讨论64.1特异卵黄抗体对鳗弧菌的体外抑菌效果64.2特异卵黄抗体对感染鳗弧菌的克氏原螯虾的保护作用84.3讨论95小结105.1结论105.2展望10致谢12参考文献13摘要:目的：研究抗鳗弧菌（Vibrioanguillarum）鸡卵黄抗体(IgY)的体内、外抑菌效果。方法：分别将鳗弧菌高免卵黄抗体、普通卵黄抗体与2×103CFU/ml的鳗

2、弧菌悬液等体积混合0、1小时后，对混合液中的活菌总数进行计数、比较，以测定IgY在体外的抑菌效果；分别将鳗弧菌高免卵黄抗体、普通卵黄抗体、生理盐水与1×108CFU/ml的鳗弧菌悬液等体积混合均匀后，注射入克氏原螯虾体内，观察其死亡情况，以测定其体内抑菌效果。结果：实验表明与普通卵黄抗体相比，鳗弧菌高免卵黄抗体与新鲜培养的活鳗弧菌菌液混合中和后，表现出了明显的抑菌活性；注射特异性鳗弧菌卵黄抗体对感染鳗弧菌的小龙虾具有明显的保护作用，具体表现为延缓小龙虾的死亡，以及降低死亡率，而普通卵黄抗体对其没有作用。关键词:鳗弧菌;卵黄抗体;体内抑菌；体外

3、抑菌ABSTRACT：Purpose:Researchthebacteriostaticeffectofanti-VibrioanguillarumIgYinvitroandinvivo.Methods:Todeterminethebacteriostasiseffectinvitro,specificanti-VibrioanguillarumIgYandnonspecificIgYwererespectivelymixedwith2×103CFU/mlbacterialsuspensioninequal-volume.0and1hourl

4、ater,thetotalnumberoflivingbacteriuminthemixturewerecountedandcompared;Todeterminethebacteriostasiseffectinvivo,specificanti-VibrioanguillarumIgY,non-specificIgYandnormalsalinewererespectivelymixedwith1×108CFU/mlbacterialsuspension,theninjectedintocrayfishProcambarusclarkii

5、..Deathsituationwasobservedandrecord.Results:Comparedwithnon-specificIgY,specificanti-VibrioanguillarumIgYshowedobviousbacteriostaticactivityinvitro;Comparedwithnon-specificIgYandnormalsaline,specificanti-VibrioanguillarumIgYprotectedcrayfishesbydelayingdeathandreducemortal

6、ity.KEYWORDS：Vibrioanguillarum;IgY;bacteriostatic;invitro;invivo1引言鳗弧菌（Virioanguallanim）是一种对水产鱼类危害严重的细菌性病原，其传播区域广泛，能引起世界范围内的淡、海水鱼类及其它养殖动物发生弧菌病，常给水产养殖业造成巨大的经济损失[1]。它还可通过食物链感染人类，使人发生较严重的疾病[2]。鳗弧菌的致病性与许多毒力因子有关，包括由质粒编码的铁吸收系统、细胞外溶血毒素、细菌鞭毛蛋白、胞外蛋白酶等[3]。随着我国养殖业的不断发展，由于水体生态环境恶化和水产养殖

7、动物的高密度人工养殖，使鳗弧菌引起的养殖鱼、虾类疾病发生状况日趋严重，它能引起虾类黄鳃病[4]；感染大菱鲆，使其出现全身性的出血及败血症[5];引起牙鲆鳍部严重出血以及体表溃烂[6]等病症，发病严重时往往造成鱼、虾类的大批死亡，给水产养殖业造成巨大的冲击。目前，养殖基层对鱼、虾类鳗弧菌病的防治主要是使用抗生素。然而，抗生素虽有使用方便、见效快和疗效好等优点，但在实际生产中存在盲目使用和滥用药物的现象，不仅破坏了生态环境的平衡，导致生物产生耐药性，而且其残留的药物也会危及人类健康[7]。因此，探讨其它的治疗途径是一种必然的研究趋势。卵黄抗体(e

8、ggyolkantibodies,IgY)是存在于鸡、鸭、鹅等蛋禽卵黄中的一种抗体，也称卵黄免疫球蛋白(eggyolkimmunoglobulins,IgY)[8]