耐酸酒精酵母的选育.pdf

《耐酸酒精酵母的选育.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、第37卷第1期酿酒Vol.37.№.12010年01月LIQUORMAKINGJan.，2010文章编号:1002-8110（2010）01-0064-02耐酸酒精酵母的选育1,21*吕伟民,孙兴滨（1.东北林业大学，黑龙江哈尔滨150040；2.黑龙江省轻工科学研究院哈尔滨150010）摘要:以酒精酵母S8为出发菌株，通过物理和化学诱变，获得一株耐酸菌株A1，在pH=3的条件下，可以正常发酵生产酒精。关键词：耐酸；酒精酵母；选育中图分类号：TS262.2;TS261.11;TS261.15文献标识码：

2、BTheBreedingofAcidproof-alcoholYeast1,21*LVWei-min,SUNXing-bin(1.NortheastForestryUniversity,Harbin150040,HeiLongJiang,China;2.HeilongjiangProvinceLightIndustrialScienceResearchInstitute,Harbin150010,HeiLongJiang,China）Abstract:AAcidproof-alcoholyeastA1w

3、asobtainedbythewayofphysicalandchemicalmutagensintheoriginalalcoholyeastS8.theresultwasshowedthatundertheconditionsofpH=3alcoholfermentationproductionwerenormal.Keywords:Acidproof;alcoholyeast;breeding0前言采用速成片剂酵母培养基(本院专利)。酒精生产过程中，酒精糟液的污染问题一直困扰着酒精1.1.2.4.

4、2液体种子培养基生产企业。酒精糟液酸度较大，如果全部代替清水进行配料，玉米糖化液12BX，过滤，121℃灭菌20min。则酵母发酵会受到严重的抑制。本实验以酒精酵母S8为出发1.1.2.4.3液体发酵培养基菌株通过物理、化学诱变，筛选出一株耐高酸的酒精酵母A1，称取玉米面100g(淀粉含量72.1%)，置于500mL三角瓶使酒精糟液回配成为可能，从而从根本上解决了酒精厂的糟中，加酒精糟液300mL,摇匀，加耐高温α-淀粉酶水污染排放问题。(20000u/mL)0.1mL，煮沸，在0.1Mpa压力下灭菌1

5、5min，冷却1材料与方法至60℃，加入0.2mL糖化酶(50000u/mL)，维持58℃~60℃糖1.1实验材料化60min，糖化醪冷却至30℃。1.1.1发酵菌种1.2实验方法以黑龙江省轻工科学研究院保藏的耐高温酒精酵母S81.2.1诱变育种为出发菌株，经物理和化学诱变，最终确定一株新的酵母菌A1。1.2.1.1菌悬液的制备1.1.2实验原辅材料将酒精酵母S8置于液体种子培养基中，30℃，120r/min，1.1.2.1玉米面(淀粉含量72.1%)市售。培养12h，以4000r/min速度离心3mi

6、n，弃去上清液，将菌泥用1.1.2.2耐高温α-淀粉酶(20000u/mL)张家港市金源生物化无菌生理盐水洗涤2~3次，倒入装有玻璃珠的小三角瓶中振工有限公司。荡30min，用平板菌落计数法将菌悬液浓度调节为107个/mL。1.1.2.3糖化酶(50000u/mL)张家港市金源生物化工有限公1.2.1.2物理诱变司。取菌悬液10mL置于直径9cm的培养皿中，于距离1.1.2.4培养基20cm，功率为15W的紫外灯（照射前紫外灯需接通电源预热1.1.2.4.1斜面种子培养基20min）下直接照射3600e

7、rg/mm2，将经诱变处理的菌悬液梯度稀释，取10-1~10-6稀释度的菌悬液均匀涂布于平板上（采用收稿日期:2009-10-16速成片剂酵母培养基），30℃培养。作者简介：吕伟民（1971-），男，黑龙江省人，高级工程师，东北林业大1.2.1.3化学诱变学在读研究生，获黑龙江省科技进步二等奖两项，完成省市级科研项将经过紫外线诱变后的菌种制成菌悬液，取菌悬液目多项。10mL，加入40mLpH6.0的磷酸缓冲液，再加入1%的硫酸*通讯作者：孙兴滨64第一期吕伟民，等：耐酸酒精酵母的选育2010二乙酯处理3

8、0min，用25%的硫代硫酸钠中止反应，将经诱变出发菌株S→稀释适当倍数（107个/mL）→紫外线照射8处理的菌悬液梯度稀释，取10-1~10-6稀释度的菌悬液均匀涂3600erg/mm2→1％硫酸二乙酯处理30min→平板培养基→长布于平板上（采用速成片剂酵母培养基），30℃培养。出单菌落→挑入斜面→发酵实验→选出发酵力高的菌株→进1.2.2酒精浓度测定方法[2]一步平板分离→挑出发酵力高的菌株，结果见表1：1.2.2.1仪器表1耐高酸酒