实验五 厌氧菌和白喉菌.ppt

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1、注意:不要打开培养皿!!!实验5厌氧细菌和白喉杆菌实验目的：了解厌氧菌的培养方法及其常用培养基介绍.熟悉常见厌氧菌的形态结构特征和厌氧培养基内生长现象.熟悉白喉杆菌的形态结构特征.实验内容：厌氧培养方法介绍和厌氧培养示教.常见厌氧菌的形态结构观察.厌氧培养基上厌氧菌的生长现象观察.Albert染色观察白喉杆菌形态结构.一、厌氧菌培养方法厌氧菌所需的气体环境:无游离氧，5%-10%的CO21.化学方法2.物理学方法3.生物学方法1化学法：保险粉法:Na2S2O4+2NaHCO3+O2=2CO2+Na2SO4+Na2SO3+H2O产气袋法：KMB4+H2O→H2+O2→H2O焦

2、性没食子酸法：焦性没食子酸+碱液+O2→焦性没食子橙钯2物理法：抽气换气法厌氧手套箱3生物法牛乳基庖肉基庖肉培养基:生成不饱和脂肪酸、还原性谷胱甘肽肉汤肉渣凡士林牛乳培养基:pH6.8牛奶(糖、蛋白……）石蕊(pH指示剂<5,红色;5-8,紫色;>8,蓝色)凡士林.保险粉法培养破伤风杆菌。（示教）2.常见厌氧菌的形态结构观察（示教镜）破伤风梭菌的芽胞：正圆形、比菌体大，位于菌体末端（特殊染色，x1000）产气荚膜杆菌粗大的菌体和宽厚荚膜（负染，x1000）双岐杆菌：G+b，有时有分支生长（G’S，x1000）庖肉培养基石蕊牛奶培养基破伤风梭菌肉汤混浊，肉渣消化，产生气体/产

3、气荚膜梭菌代谢活跃，产酸且大量产气“汹涌发酵”现象：分解糖产酸产气。产酸使蛋白凝固，产气使凝固蛋白被冲成蜂窝状，凡士林被推向试管口；酸使石蕊呈红色3.厌氧培养基上厌氧菌的生长现象观察乳糖酸+气体牛乳酪蛋白凝固冲烂“汹涌发酵”现象的发生机理：产气荚膜梭菌4.Albert染色观察白喉杆菌形态结构吕氏血清斜面培养基---白喉杆菌（1）制片：涂片—干燥—固定（2）Albert染色步骤：染液A：3-5min，水洗.染液B：1min，水洗，干燥。（3）油镜观察：形态，排列，异染颗粒.典型排列呈L,V型或栅栏状，一端或两端有比菌体染色深的异染颗粒。实验报告绘图描述白喉杆菌Albert染色

4、结果THANKS