基因工程的基本操作程序课件.ppt

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1、生物选修3(人教版)专题1基因工程1.2基因工程的基本操作程序比较DNA复制PCR技术区别解旋方式解旋酶催化DNA在高温作用下变性解旋场所细胞内(主要在细胞核内)细胞外(主要在PCR扩增仪内)区别酶DNA解旋酶、普通的DNA聚合酶等耐热的DNA聚合酶(Taq聚合酶)温度条件细胞内温和条件需控制温度,在较高温度下进行合成的对象DNA分子DNA片段或基因联系①模板:均需要脱氧核苷酸链作为模板进行物质合成②原料:均为四种脱氧核苷酸③酶:均需要DNA聚合酶进行催化④引物:均需要引物,使DNA聚合酶从引物的3′端开始连接脱氧核苷酸受体细胞方法植物细胞(体细胞)①农杆菌转化法:目的基因插入

2、Ti质粒的T-DNA→农杆菌→导入植物细胞→稳定维持和表达②基因枪法:是单子叶植物中常用的一种基因转化方法,但是成本较高③花粉管通道法:这是我国科学家独创的一种方法,是一种十分简便经济的方法动物细胞(受精卵)显微注射法:含有目的基因的表达载体提纯→取卵(受精卵)→显微注射→受精卵发育→获得具有新性状的动物微生物细胞(原核细胞)Ca2+处理细胞→感受态细胞→表达载体与感受态细胞混合→感受态细胞吸收DNA分子→目的基因随受体细胞的繁殖而复制比较起始(终止)密码子启动(终止)子本质三个相邻碱基DNA片段位置位于mRNA上位于DNA上作用启动(终止)翻译启动(终止)转录类型步骤检测内容

3、方法结果显示分子水平检测第一步目的基因是否进入受体细胞DNA分子杂交(DNA和DNA之间)是否成功显示出杂交带第二步目的基因是否转录出mRNA分子杂交技术(DNA和mRNA之间)是否成功显示出杂交带第三步目的基因是否翻译出蛋白质抗原—抗体杂交是否成功显示出杂交带个体水平鉴定需要做抗虫、抗病的接种实验,以确定是否有抗性以及抗性的程度;基因工程产品与天然产品的功能进行活性比较,以确定二者的功能活性是否相同等谢谢观看希望提出指导与建议

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