拟南芥AT2G17350基因功能的初步研究.pdf

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1、分类号Ｑ９４３．２密级公开学号口２０化国－＂ＭｉｒＶＶＢｌＢＢｌＭｌＩ硕ｉ学位沧文（学术型）￣题目拟南芥／＼７２ＧＪ巧５０基因功能的初步研究作者岳思思指导教！）巧王詰之教授－级学科名称生物学二级学科名務植物学提交日期二〇—五年五月学位论文原创巧声明本人声明所呈交的学位论文是我在导师的指导下进行研巧工作所取得的研究成果。尽我所知，除文中已经法明引用的内容和致谢的地方外，本论文不包含其他个人或集体已经发表或撰写过的研巧成果，也不包含本人或他人己申请学位或其他用途使用过的成果？对本文

2、的研巧做出重要贡献的个人和集体，均己在文中作了明确说明并表示谢意。一本学位论文若有不实或者侵犯他人权利的，本人愿意承担切相关的法律责任。：作者签名：日期社年地月日学位论文知识产权及使用授权声明书本人在导师指导下所完成的学位论文及相关成果，知识产权归属陕西师范大学。本人完全了解陕西师范大学有关保存、使用学位论文的规定，允资本论文被査阅和借阅，学校有权保留学俭论文并向国家有关部口或机构送交论文的纸质版和电子版，可抖采用，有巧将本论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索任何复制手段保存和汇编本论文？本人保证毕业离校后，发表本论文或使用

3、本论文成果时署名单位仍为陕西师范大学。保密论文解密后适用本声明。作者签名：日親ｘＴｆｒ年如月日摘要一种草本植物拟南芥是十字花科巧南芥属的，它广泛分布于世界各地。作为模式植物其基因组测序早己公布，但仍有大量的基因功能未知。本研究主要从反向遗传学角度对未知基因扣０的功能进行初步的探讨。分析该基因在不同条件下转录水平和蛋白水平的表达情况，＾推测该基因可能具有的生［物学功能，一为进步的实验研究奠定基础。本研究的主要内容和结果如下：－１ＲＴＰＣＲ方法对：．采用实时巧光定量ｑ进行基因表达分析检测飾２Ｇ７７ｊ５０基因分别在低温、高温、短

4、时间脱水和外源激素ＡＢＡ、ＧＡ、ＭｅＪＡ３处理条件下的表达情况。结果显示如基因对低温、富温、短时间脱水处理都表现出应癌反应；在外源激素的诱导下，该基因表达量显著上调。初步推测＾７２６７７１５０基因响应植物的胁迫诱导，可能在植物的生长发育过程中起着关键的作用。２．对基因进斤生物信息学分化预测得到四个可能与其互作的蛋白，它们分别为ＡＴ３Ｇ２巧８０（ＭＡＤ２，有丝分裂纺键体检验点蛋白）、ＡＴ５Ｇ６５９４０ＣＨＹ一（，种具有水解酶活性的过氧化物酶蛋白，对脂肪酸的新陈代谢起着重要的一—６Ａ－－作用）、ＡＴ４Ｇ１１４３（ＩＭＰ２，种胞内转运蛋白）、

5、ＡＴ４Ｇ０２１５０（ＩＭＰＡ３，。种参与蛋白转运和绑定的蛋白，并响应胁迫）这四种蛋白在生物过程中都发挥着。－重要的作用，并且它们之间不存在共表达的关系克隆发现Ｃ７／７、／ＭＡ４２和Ｍ，／／心Ｊ这Ｈ条基因除了Ｔａｉｒ网站公布的己有剪切方式外，均还存在更多的剪切方一－式。其中ＣＷ７和／ＭＡ４２还存在５种剪切形式，也还存在另种剪切方式。３．利用酵母双杂交方法研究蛋白的相互作用，结果表明ＡＴ２Ｇ１７３５０蛋白与－２－３ＭＡＤ２、ＩＭＰＡ、ＩＭＰＡ蛋白具有相互作用。同时构建了原核表达载体，采用一ＧＳＴ－Ｐｕ。ｌｌｄｏｗｎ的方法对酵母双杂交结果进行体外验

6、证进步证明了ＡＴ２Ｇ１７３５０与ＭＡＤ２具有相互作用，推测如可能参与细胞有丝分裂过程。４－－．结合饼干涉、过表达植株和Ｍ４公２、ＣＷｒ、化化４２、／Ａ化４３的一突变体植株用ＲＴ－ＰＣＲ对这五条基因的相互关系进：，运ｑ步研究。结果表明①五条基因在花、果芙，其中在花和果芙中表达量都显、枝叶和莲座叶中均有表达一。７著上调，表达模式基本致風４７（７／７扣０在其它四条基因的突变体中表达量都显著上调时＾巧６八扣一，表明当其他基因缺失，０可能发挥着种补偿作用。⑤公２Ｉ在＾４巧货７３５〇干涉植株的果英和＾巧货７扣０突变纯合体（ＨＭ）中表达量上调，一种

7、括抗关系过表达植株的果英中下调，说明＾巧和Ｍ１Ｄ２可能存在。④／ＭＡ４－２诚化４－３４巧６八３如的干涉从和在／、过表达和ＨＭ植株中表达情况来看，一－２相关性不大心２Ｇ八３５０与和／ＭＭ。，具体酌关系还需进步研究５．从文献中筛选得到７条有丝分裂相关基因，分别为始４公／、如Ｍ、公脱乂７、風／Ｗ、ｏ／ｃ２０、ＣＺ）７ｉ：和雌ｗｉ（均为有丝分裂检验点的关键蛋白，参与ＤＮＡ的损伤应答）。在已有的植株中分析它们的表运量，结果表明运些基因在＾ｒ２Ｇ／７３５０的干涉和突变纯合体ＨＭ植株中表达量都显著上升。说明＾ｒ２Ｇ