猪病-猪伪狂犬病.ppt

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1、伪狂犬病(Pseudorabies,PR) (Aujeszky’sdisease)一、概述伪狂犬病是由PRV引起的家畜和多种野生动物的急性传染病。牛、羊、猫、犬、许多野生动物、肉食动物及野生啮齿类等动物发病后通常具有发热、奇痒及脑脊髓炎等典型症状,均为致死性感染,但呈散发形式。猪是PRV的贮存宿主和传染源。人对PRV无易感性。二、病原体PRV属于疱疹病毒科α疱疹病毒亚科猪疱疹病毒I型。无囊膜的病毒颗粒直径约为110-150nm,带囊膜的成熟病毒粒子的直径约180nm。衣壳壳粒的长度约12nm,宽9nm。其空心部份的直径约4nm。囊膜表面有呈放射状排列的纤突。伪狂犬病病毒粒子形态三、发病机理多种

2、因素:猪的年龄、病毒毒株、感染剂量和途径扁桃体、咽粘膜增殖,然后经嗅神经、三叉神经和吞咽神经的神经鞘淋巴达到脊髓和脑中枢神经系统的炎症四、流行病学特点1.易感宿主:猪是贮存宿主,其他动物如牛、羊、猫、犬、兔、小鼠也可感染。2.传播途径:(1)水平传播:病毒主要通过已感染猪排毒而传给健康猪,病毒污染的人员和器具。通过鼻分泌物、乳汁和精液空气传播扩散。(2)垂直传播:怀孕母猪能发生垂直传播。(1)流产胎儿、阴道分泌物和胎盘是病毒的主要传染源。(2)野毒感染猪、弱毒疫苗免疫猪都会导致潜伏感染。在特定的自然条件的刺激或环境压力下,如贩运、分娩等可导致潜伏状态的病毒复活、扩散。4、流行季节:具有一定的季

3、节性,多发生在寒冷的季节,但其它季节也有发生。3、传染源五、症状及病型1.妊娠母猪:流产、产死胎、木乃伊胎,其中以产死胎为主。寒冷季节即冬末初春多发生。母猪则表现为返情、屡配不孕。2.新生仔猪:表现高热、食欲废绝、呼吸困难、呕吐腹泻、抑郁震颤、神经症状,昏迷以至衰竭死亡,15日龄以内仔猪死亡率高达100%。剖检主要是肾脏布满针尖样出血点、有时见到肺水肿、脑膜表面充血、出血。3.断奶仔猪发病率20%-40%,死亡率10%-20%左右,主要表现为神经症状、拉稀、呕吐等。4.种猪不育症。公猪感染伪狂犬病病毒后,公猪发生睾丸肿胀、萎缩等种用性能降低或丧失;5.成年猪仅表现增重减慢等轻微温和症状。1.病

4、毒分离鉴定:猪、牛、兔、犬、猫、猴、驹和雪貂的肾细胞牛的睾丸细胞,鸡胚成纤维细胞、PK-15、IBRS-2细胞,Vero细胞,仓鼠的BHK-21细胞。六、诊断2.ELISA3.乳胶凝集试验(LAT)4.PCR5.中和试验法(SNT)6.间接血凝集试验(IHA)12345678920001000图1PRVDNAPCR扩增产物的凝胶电泳(N=3)1.TakaraDL-2000Marker;2.扁挑体;3.胸腺;4.颈部淋巴结;5.腹股沟淋巴结;6.大脑;7.小脑;8.嗅球;9.脊髓100250鉴别诊断伪狂犬病的鉴别诊断是在使用伪狂犬病的基因标志疫苗的前提下应用的一种诊断方法。伪狂犬病的基因标志疫苗

5、—是在TK基因缺失的基础上,将病毒的非必需糖蛋白基因(gE和gG)进行缺失,得到的突变株就不能产生被缺失的糖蛋白,但又不影响病毒在细胞上的增殖与免疫原性。将这种基因标志疫苗注射动物后,动物不能产生抗缺失蛋白的抗体。因此,可通过血清学方法将自然感染野毒的血清学阳性猪与注苗猪区分开来。gG-ELISA鉴别诊断{全病毒抗原{gG蛋白抗原阳性血清(全病毒)阳性血清(全病毒)阳性血清(gG缺失)阴性血清阳性血清(gG缺失)阴性血清1280640320160804020101伪狂犬病毒gG基因的克隆与表达2伪狂犬病gG-乳胶凝集试验(gG-LAT)鉴别诊断方法的建立3伪狂犬病gG-酶联免疫吸附试验(gG-

6、ELISA)鉴别诊断方法的建立gG在E.coli中的表达1234PrVEa株gG、gE的体外表达gE在酵母中的表达gE在E.coli中的表达伪狂犬病鉴别诊断试剂盒伪狂犬病毒gG、gE-LAT鉴别诊断试剂盒伪狂犬病gG、gE-ELISA鉴别诊断试剂盒4种鉴别诊断试剂盒均已申报国家新兽药证书,进入最后的复核阶段。七、综合防制1、疫苗的免疫预防(1)灭活疫苗免疫程序:种猪第一次注射后,间隔4-6周后加强免疫一次,以后每6个月注射一次,产前一个月加强免疫一次。留作种用的断奶仔猪在断奶时注射一次,间隔4-6周后,加强免疫一次,以后按种猪免疫程序进行。育肥用的断奶仔猪在断奶时注射一次,直到出栏。(2)基因

7、缺失疫苗仔猪、乳猪及育肥猪首免日龄根据母源抗体水平而定,可1日龄滴鼻免疫或断奶时免疫或70~80日龄免疫,一个月后加强免疫一次;种猪则根据当地疫情和实际情况每年免疫2~4次。免疫程序:伪狂犬病TK-/gG-基因缺失弱毒疫苗伪狂犬病TK-/gE-基因缺失弱毒疫苗TK-/gG-/LacZ+双基因缺失疫苗生产按常规方法制备鸡胚成纤维单层细胞,将TK-/gG-/LacZ+双基因缺失突变株按所加培养液1:1

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