犬狂犬病毒抗体检测试剂盒使用说明书.doc

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1、犬狂犬病毒抗体检测试剂盒使用说明书原理：本试剂盒采用酶联免疫方法（ELISA）检测犬血清中的特异性抗狂犬病毒抗体，用于全职面以后抗体监测。试剂组成：1.预包被板48T/96T8.终止液1支2.酶结合物原液2支9.临界对照品1支3.酶结合物稀释液2支10.阴性对照品1支4.洗涤液（PBST干粉）1/2支11.自封袋1个5.底物（3号液）1支12.使用说明书1份6.显色液（4号液）1支7.样本稀释液（5号液）1支操作程序：1.酶结合物工作液配制：取1支酶结合物原液全部加入到1支酶结合物稀释液中，充分混匀即可使用。2.洗涤液配制：每袋PBST干粉用蒸馏水500ml溶解

2、均匀，即为洗涤液。3.加样反应：每滴孔加样品稀释液2滴，加待检样品各50ul。每次试验需设阴性对照，临界对照各2孔，空白孔1孔，（阴性对照、临界对照已稀释，试验时可直接取100ul加入孔内，空白孔仅加2滴样品稀释液）。放置37摄氏度20分钟。倾去孔内液体，将已配制好的洗涤液加满每孔并静置30秒，倾去，甩干，共洗涤5次，拍干。4.加酶反应：除空白对照孔外，其余每孔加已稀释的酶结合物2滴，置37摄氏度20分钟，然后如上洗涤。5.显色反应：加底物（3号液）和显色剂（4号液）各1滴，混匀，37摄氏度下避光显色10分钟，加终止液（6号液）1滴，混匀，终止反应后判读结果。结

3、果判断：以空白对照调零，用酶标仪于450nm（630nm作参比波长）读取吸光度（A值）。A值>=临界对照均值为阳性，说明待检样品的抗体滴度>=0.5IU/ml；低于者说明待检样品的当提浓度<0.5IU/ml。注意事项：1.试剂盒于2—8摄氏度保存，有效期6个月。每次使用前应先平衡至室温。1.未使用完的板条应密封保存，已稀释的酶结合物工作液应尽快使用。2.试剂盒中终止液具有腐蚀性，要小心使用。3.瓶盖每次使用后要拧紧，各瓶盖之间不能混用。不同批号试剂盒的试剂组分不可混用。4.试验样品应为无染菌、无血脂、无溶血的血清。任何样本都应视为传染源妥善处理。5.37摄氏度孵

4、育时，建议使用水浴箱。如无条件，可在温箱中放置湿盒进行反应并同时用不干胶膜封盖板孔。特别提示：在使用酶结合物工作液之前，应确保酶结合物原液已加入酶结合物稀释液中并混匀！请在工作液瓶签上注明配置时间。