DB34∕T 2785-2016 油菜抗根肿病人工接种鉴定技术规程.pdf

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1、ICS65.020.20B05DB34安徽省地方标准DB34/T2785—2016油菜抗根肿病人工接种鉴定技术规程TechnicalRegulationsforArtificialInoculationofRapeseedResistancetoClubrootDisease文稿版次选择2016-12-30发布2017-01-30实施安徽省质量技术监督局发布DB34/T2785—2016前言本标准根据GB/T1.1-2009给出的规则起草。本标准由安徽省农业科学院作物研究所提出。本标准由安徽省农业标准化技术委员会归口。本标准主要起草单

2、位：安徽省农业科学院作物研究所。本标准参与起草单位：安徽省黄山市农业科学研究所。本标准主要起草人：费维新、胡宝成、李强生、侯树敏、陈凤祥、荣松柏、王淑芬、初明光、江莹芬、郝仲萍。IDB34/T2785—2016油菜抗根肿病人工接种鉴定技术规程1范围本标准规定了油菜品种根肿病抗性鉴定依据、实验菌株的扩繁与保存、育苗基质的配置、接种液的制备、接种苗的培养、人工接种技术和抗性评价方法等。本标准适用于油菜品种资源根肿病的抗性鉴定及评价。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡

3、是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法GB15981消毒与灭菌效果的评价方法与标准SN/T2632微生物菌种常规保藏技术规程3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1寄主host一种能够被病原菌侵染并引起病害的生物体。3.2病原菌株pathogenicisolate从植物发病部位通过人工培养、纯化、再接种和分离等方法获得的病原菌的分离培养物。3.3休眠孢子悬浮液restingsporessuspension病菌休眠孢子均匀分散于水中不下沉，与水混合形成孢子悬浮

4、液。3.4接种浓度inoculumsconcentration用于人工接种的单位体积内病菌休眠孢子的数量。1DB34/T2785—20163.5人工接种artificialinoculation在适宜条件下，通过人工操作将接种体置于植物体感病部位并使之发病的过程。3.6抗病性diseaseresistance植物体所具有的能够减轻或抑制病原物致病作用的可遗传的性状。3.7抗性评价evaluationofresistance根据采用的技术标准判别寄主植物对特定病害反应程度和抵抗水平的描述。3.8病害级别diseaseratingscal

5、e植物个体或群体发病程度的数值化描述。3.9根肿病clubrootdisease由芸薹根肿菌Plasmodiophorabrassica侵染引起的一种土传病害，主要危害十字花科作物根部并形成根部肿大。4抗性鉴定依据芸薹根肿病菌PlasmodiophorabrassicaeWoronin是一类真核的细胞内寄生病原菌，属真核生物Eukaryota，原生动物界Protozoa，根肿菌门Plasmodiophoromycota，根肿菌纲Plasmodiophoromycetes，根肿菌目Plasmodiophorales。由Plasmodio

6、phorabrassicae病菌侵染引起的油菜病害称为油菜根肿病。抗性鉴定依据：抗性鉴定依据油菜根肿病为害症状，分级标准以Williams病害分级方法为基础，结合相关分级方法修订而成。苗期油菜根肿病分级标准详见附录A。5主要仪器和用具生物显微镜，植物生长箱，高速冷冻离心机，纯水仪，超净工作台，高压灭菌锅，冰箱，粉碎机，电子天平（感量0.01g），移液器，离心管，吸管，三角瓶，医用血球计，育苗盘及托盘。6主要试剂与材料75％乙醇酒精，浓盐酸，根肿菌的主要致病生理小种病原菌株，油菜根肿病感病对照品种Westar和抗病对照品种Mendel，

7、泥炭土，蛭石，珍珠岩。2DB34/T2785—20167实验菌株的扩繁实验用菌株用油菜感病品种Westar或速生2号接种扩繁，方法同人工接种，接种后60天（d）收获肿根，并用自来水洗净后登记繁殖寄主品种、生理小种类型、日期、人员等信息，并于-20℃冰箱储存备用。8育苗基质的配置使用的营养基质为接种用专用配方土，主要成分为泥炭土、蛭石、珍珠岩，并按照体积比1:1:1均匀混合。在使用前将配置的营养基质先用高压灭菌锅灭菌处理（121℃，30min），参照GB15981标准；然后将灭菌的营养基质分装入50孔（每孔100ml）的育苗盘中，接种前

8、营养土用自来水浇透，并放在配套的托盘上。9接种液的制备从冰柜中取出储藏在-20℃下的一个油菜肿根（30g左右），置于室温下1小时（h），将解冻软化后的肿根放入粉碎搅拌机（型号JYL-C16D，功率250W）中，加入100