芽孢杆菌与光合细菌协同作用对养殖刺参的影响.pdf

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1、《渔业现代化》2013年第40卷第1期7芽孢杆菌与光合细菌协同作用对养殖刺参的影响11112李君华，刘佳亮，曹学彬，李静，刘石林，111王得宾，高滨，王国文(1山东东方海洋科技股份有限公司海参研究中心，山东烟台264003;2中国科学院海洋研究所，山东青岛266071)摘要:为研究芽孢杆菌和光合细菌协同作用对刺参养殖水质及其生长、消化和免疫的影响，测定了水体化学+－需氧量(COD)、氨氮(NH4-N)和亚硝酸盐氮(NO2-N)24h的变化量、肠道蛋白酶和淀粉酶的活性以及体腔液超氧化物歧化酶(SOD)、碱性磷酸酶(AKP)和溶菌酶(LSZ)的活力。结果显示，混合菌投喂组优于单一菌

2、54投喂组。在芽孢杆菌和光合细菌投喂浓度以1．86×10和1．75×10CFU/mL搭配时，该实验组协同作用效+－果最优，水体COD、NH4-N和NO2-N含量均显著低于对照组(P＜0．05);刺参特定生长率最大(0．76%/d)，较对照组提高56．8%，成活率亦最高(97．8%);蛋白酶和淀粉酶活性最高(96．72和98．72U/mgprot)，较对照组显著提高149%和44．82%;体腔液SOD活力最高(65．16U/mL)。而两种菌对刺参AKP和LSZ活力的影响较小。研究表明，芽孢杆菌和光合细菌搭配合理效果更佳，能够有效改善养殖环境，提高刺参消化酶活性和免疫力，促进刺参生

3、长。关键词:刺参;芽孢杆菌;光合细菌;水质;消化酶;免疫因子doi:10．3969/j．issn．1007-9580．2013．01．002中图分类号:S968．9文献标识码:A文章编号:1007-9580(2013)01-007-06刺参(Apstichopusjaponicus)俗称海参，属棘皮养殖的影响尚未见报道。本文较为全面地分析了动物门，是我国北方沿海重要的海水养殖品两者间的协同作用对刺参养殖水体及其生长消化［1］种。近几年刺参养殖业发展迅速，仅山东地区和免疫的影响。2007年刺参增养殖产值已突破100亿元。但是，随着海参养殖业的发展，其疾病问题接踵而至，以1材料与方

4、法“腐皮病”为主的疾病爆发，以及抗生素长期使用1．1材料或滥用引起的抗药性及药物残留、废水污染问题，光合细菌(Photosyntheticbacteria，PSB)、荚已经成为限制该产业健康稳定发展的瓶颈。膜红假单胞菌(Rhodopseudomonascapsulata)与枯目前水产养殖生产上用得比较多的光合细草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)均来自于山东东方菌、芽孢杆菌复合菌的生长特性、作用机制都有较［2-3］海洋科技股份有限公司微生物实验室，所有分离多研究报道。芽孢杆菌与光合细菌的研究主［4-8］所得的微生物鉴定及培养配方均按《伯杰氏系统要集中在淡、海水养殖鱼虾

5、类。通常情况下，［16］细菌学手册》的标准方法进行。菌液由实验室光合细菌具有消除污染、净化水体的作用;而芽孢8杆菌可以与养殖环境中的有害藻类及水产致病菌自行培养，菌液浓度分别为10×10CFU/mL和9竞争形成优势种，从而抑制有害藻类及水产致病3×10CFU/mL。菌。如果两者协同作用将产生明显的处理效1．2实验设计和日常管理［7，9-11］果。目前，益生菌已经应用于刺参养实验刺参选自山东东方海洋科技股份有限公［12-15］殖，但芽孢杆菌与光合细菌协同作用对刺参司良种场刺参生产车间，体重(2．60±0．08)g。收稿日期:2012-12-26修回日期:2013-01-27基金项

6、目:2011年山东省农业良种工程;海阳市科学技术发展计划项目(2011041)作者简介:李君华(1983—)，女，工程师，硕士，研究方向:养殖刺参水质调控及营养饲料。E-mail:marinejh@yahoo．cn8《渔业现代化》2013年第40卷第1期实验容器为60L的蓝色塑钢水箱，每个水箱放30消化道在冰浴中用玻璃研磨器匀浆10～15头刺参，养殖用水盐度(29±1)PSU，水温在14．8min，按1g样品10mL缓冲溶液的比例分次加入～18．6℃，并保持24h充氧;每天换水50%左pH7．0的磷酸盐缓冲溶液，然后将匀浆液在高速右，换水时清理粪便和残饵，保持水箱内清洁;换冷冻

7、离心机中以4℃，5000r/min冷冻离心30水后加入新鲜海水后投喂饲料，投喂量为刺参体min，其上清液即为粗酶提液，4℃保存。此粗酶［17］重的5%(配合饲料与海泥以1∶1投喂)，并根据提液在24h内分析完毕。刺参摄食情况作适当的调整。实验周期75d，实水质理化指标的测定化学需氧量(COD):［18］验开始前暂养1周，并饥饿2d后开始实验。碱性高锰酸钾法;氨氮:纳氏试剂法(HJ535—实验设对照组(CK)、芽孢杆菌组(Y:1．86×2009);亚硝态氮:萘乙二胺分光光度法(GB547493