绿豆萌发过程中SOD的分离纯化及性质研究.pdf

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1、第23卷第6期化学研究与应用Vo1.23,No.62011年6月ChemicalResearchandApplicationJun.,2011文章编号:1004—1656(2011)06-0726-05绿豆萌发过程中SOD的分离纯化及性质研究董银卯,唐冬雁,何聪芬,赵华(1.哈尔滨工业大学化学系,黑龙江哈尔滨100051;2.北京工商大学化学与环境工程学院,北京,100048)摘要:制备不同萌发时期绿豆SOD(超氧化物歧化酶)粗酶液,筛选出酶比活力最高的时期,并运用热变性、硫酸铵分级、DEAE—SepharoseFF阴离子交换层析和SephacrylS-100

2、HR分子筛层析分离纯化并作对比考察,提纯的SOD进行了理化性质研究。结果表明,绿豆种子萌发第3天时SOD的比活力最高,经纯化获得的SOD酶比活力为2256.4U/mg,纯化倍数为3.9。绿豆中SOD为Cu/ZnSOD和MnSOD,分子量为68KD,热稳定性高,在pH5-8条件下稳定,对高浓度SDS具有抗性。EDTA可以一定程度上抑制SOD活性,H:O:可以完全抑制SOD活性。关键词:绿豆萌发;超氧化物歧化酶(SOD);分离纯化;性质中图分类号:0629.8文献标识码:ASeparation,purificationandpropertiesofsuperoxi

3、dedismutasefromgerminationofmungbeanDONGYin.mao,TANGDong—yan,HECong.fen,ZHAOHua,(1.Departmentofchemistry,HarbinInstituteofTechnology,Haebinl00051,Helongjiang,China;2.SchoolofChemicalandEnvironmentEnganeefing,BeijingTechnologyandBusinessUniversity,Beijing100048,BeringChina)Abstract:T

4、hediferentperiodsofgerminationofmungbeanwasusedtopreparethecrudeSODenzymeextract,andthehighestspecificactivityduringtheperiodofcrudeenzymesolutionwasscreened,thenthesolutionWasseparatedandpurifiedbythether-maldenaturation,ammoniumsulfatefractionation,DEAE—SepharoseFFanion-exchangech

5、romatographyandSephacrylS100mo-lecularsievechromatography,finallythephysicalandchemicalpropertiesofthepureSODenzymewerestudied.TheresultsshowedthemaximumspecificactivityofSODontheseedgermination3daysofmungbean,andthepurifiedSODenzymespecificactivitywas2256.4U/mg(purificationfactor3.

6、9).AsthestructureofSODinMungbean,Cu/ZnSODandMnSODhaveamo·leeularweightof68KD,highthermalstability,stabilityinthepH5-8,andresistanttohighconcentrationsofSDS,anditsactivitywasabletoinhibitedbyEDTAandcompletelyinhibitedbyH2O2.Keywords:mungbeangermination;superoxidedismutase;purificatio

7、n;properties绿豆为豆科草本植物的成熟种子,含有丰富豆从休眠的静态跃升为生理活动频繁的动态的过的营养成分,绿豆在发芽的过程中,其营养成分含程,此时绿豆的呼吸作用增强,酶的种类和数量显量出现消长变化,是因为发芽是将有生命力的绿著增加,酶活性的加强使绿豆的新陈代谢能在较收稿日期:2011-09-21;修回日期:2011-01-26联系人简介:董银卯(1963.),男,教授,研究方向:植物源化妆品功能成分开发与功效检测。Email:ymdong2008@163.com第6期董银卯等:绿豆萌发过程中SOD的分离纯化及性质研究727高水平上进行,同时启动大量酶

8、促反应进行生物发芽势强的优质绿豆,将其

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