SIAH2蛋白在肝细胞癌发生、发展中的作用研究.pdf

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1、中华肝脏外科手术学电子杂志2014年6月第3卷第3期ChinJHeoatSur~(ElectronieEdition)，June2014，Vo1．3，No．3．51，·基础研究·SIAH2蛋白在肝细胞癌发生、发展中的作用研究刘瑞磊王佳妮张鹏张翘楚李玺姜华黄勇【摘要】目的探讨SIAH2蛋自在肝细胞癌(肝癌)发生、发展中的作用。方法取对数生长期的人肝癌细胞Bel一7404，分别将空载体小干扰核糖核酸(siRNA)及SIAH2siRNA转染至人肝癌细胞Be1．7404中，将转染后细胞分为contro1．siRNA组和SIAH2．siRNA组。以

2、B一肌动蛋白(13-actin)为对照，采用蛋白质印迹法检测两组人肝癌细胞Bel一7404的SIAH2蛋白表达情况。采用噻唑蓝法检测两组细胞增殖情况，采用细胞划痕实验观察两组细胞迁移情况，采用Transwell实验观察两组细胞侵袭情况。两组间的数据比较采用t检验。结果control—siRNA组和SIAH2一siRNA组的SIAH2蛋白平均相对表达量分别为0．71~0．02、0．33~0．01。与control—siRNA组相比，SIAH2．siRNA组的SIAH2蛋白相对表达量明显减少(卢一4．629，P<0．05)，增殖速度亦明显下降

3、。control—siRNA组的细胞迁移率为(45．3i0．4)％，SIAH2一siRNA组为(14．34-0．4)％，SIAH2。siRNA组明显低于control—siRNA组(一3．689，P<0．05ocontro1．siRNA组的穿膜细胞数为(563~10)个，SIAH2．siRNA组为(122~7)个，SIAH2．siRNA组明显少于control—siRNA组(f=一3．428，P<0．05o结论SIAH2蛋白能促进肝癌细胞增殖、迁移、侵袭，从而加速肿瘤的发生、发展。【关键词】癌，肝细胞；细胞增殖；细胞迁移分析；肿瘤侵润；转

4、染；SIAHRoleofSIAH2proteininthedevelopmentofhepatocellularcarcinomaLiuRuilei。，WangJiani，ZhangPeng，ZhangQiaochu，LiXi，JiangHua，HuangYong．lDepartmentofThyroidandBreastSurgery,theThirdAffiliatedHospitalofSunYet—senUniversity,Guangzhou510630，ChinaCorrespondingauthor．"HuangYong,E

5、mail：huangfanyong@aliyun．com【Abstract】0bjectiveToinvestigatetheroleofSIAH2proteinintheoccurenceanddevelopmentofhepatocellularcarcinoma(HCC)．MethodsHumanHCCBel一7404cellsinlogarithmicgrowthphasewereinoculated．Emptycarriersmallinterferenceribonucleicacid(siRNA)andSIAH2siRNAw

6、eretransfectedinhumanHCCBel一7404cells．Thenthecellsweredividedinto2groups：control—siRNAgroupandSIAH2-siRNAgroup．The13-actinwastakenascontrol，andtheexpressionofSIAH2proteininhumanHCCBel·7404cellsof2groupswasdetectedbyWesternBlot．Theproliferationofcellsin2groupswasdetectedby

7、methylthiazolyltetrazolium(MTT)assay．Cellmigrationin2groupswasobservedbycellscratchtest．Cellinvasionin2groupswasobservedbyTranswellassay．Thedatain2groupswerecomparedusingttest．ResultsTheaveragerelativeexpressionofSIAN2incontro1．siRNAandSIAH2一siRNAgroupwere0．71~0．02．0．33~0

8、．01respectively．TheexpressionofSIAN2inSIAH2一siRNAgroupdecreasedobviouslycomparedwiththatDOh10．38