药物血浆浓度的测定及半衰期的计算.doc

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1、药物血浆浓度的测定及半衰期的计算姓名：学号：班级：一、实验目的1.以磺胺嘧啶钠为例学习测定药物血浆浓度、药物血浆半衰期(t1/2) 及表观分布容积(Vd)等药动学参数的基本方法。2.理解常用药动学参数的临床意义。二、实验材料1.实验动物：家兔1只2.器材：试管24支，移液吸管(10ml1支，1ml2支，2ml7支)，移液器1支，吸头若干,试管夹，试管架，离心机，722型分光光度计，手术剪，眼科剪，止血钳，动脉夹，眼科镊,缝线，药棉，纱布，捆扎绳，注射器(10ml1支，5ml1支)。3.药品：5%磺胶略啶钠溶液，7.5%三氯醋酸溶液，0.5%亚硝酸钠溶液，0.5%麝香草酚钠溶液(

2、溶于20%氢氧化钠浓度内)，草酸钾结晶，20%乌拉坦容液，肝索注射液，生理盐水。三、实验方法和步骤1.取试管6支，依次用A1、A2、A3……A6标记，各加入7.5%三氯醋酸2ml备用。2.取试管6支，依次用B1、B2、B3……B6标记,各加人草酸钾结晶几粒。3.取家兔1只，称重，以20%乌拉坦溶液1g/kg(5ml/kg)耳缘静脉注射麻醉，背位固定于手术台上，正中切开颈部皮肤，分离一侧颈总动脉，结扎其远心端，并在近心端夹上动脉夹，以阻断血流，再将放血导管向心脏方向插人颈总动脉内，用线打活结固定。4.松开动脉夹，放血约1ml，置于B管，迅速摇匀抗凝，然后耳缘静脉注人5%磺胺嘧啶钠

3、150mg/kg(3ml/kg)，记录注完时间(准确到分钟)。5.给药后5、10、20、30、40min,用同样方法放血约1ml,分别置于B2、B3、B4、B5、B6管，迅速摇匀，记录取血标本的准确时间，然后B1~B6管以1500转/min离心5min，准确吸取上层血浆50μl加人相应的各A管，各管以1500转1分离心5min,分别取离心后的上清液1.5ml,加0.5%亚硝酸钠溶液0.5ml,摇勾，再加0.5%麝香草酚1ml，可见橙红色反应.以给药前血样为空白对照，用722型分光光度计于525m波长处进行比色，测定各取血时间点的光密度，用标准曲线方程计算磺胺嘧啶钠浓度。1.标准

4、曲线的制作用免血配制不同浓度的磺胺嘧啶钠溶液，按方法5项进行重氮化及偶联反应，分别测定吸光度。以磺胺嘧啶钠溶液浓度为横坐标，其吸光度为纵坐标，进行直线回归，求标准曲线回归方程。一、实验结果给药后不同时间点的磺胺嘧啶钠浓度管号123456给药时间0.0580.0980.0860.0750.0740.075吸光度值/30.712423.707117.285516.701717.2855磺胺嘧啶钠浓度/1.48731.37491.23771.22281.2377对数磺胺嘧啶钠浓度/515204060K和t1/2换算一、实验讨论1.磺胺类药物检测机制磺胺类药物为对氨基苯磺酰胺类化合物，

5、在酸性溶液中，可与亚硝酸钠起重氮反应，产生重氮盐。在碱性溶液中，重氮盐可与酚类化合物（麝香草酚）起偶氮反应，形成橙红色的偶氮化合物。采用分光光度检测法，在525nm波长进行比色测定。根据Beer-Lambert定律，药物浓度与光密度呈正比关系。2.一级消除动力学规律多数药物在体内按一级动力学的规律而消除，静脉注射给药后，不同时间采血，测定血浆浓度，以药物浓度的对数值为纵坐标，时间为横坐标，其药时曲线常呈直线。图1.零级&一级消除动力学曲线该直线的方程为：lgCt=lgC0+(-K/2.203)t根据此曲线方程可求出斜率b值。消除速率常数K=-2.303b，进而求出血浆半衰期。药

6、物血浆半衰期为t1/2=0.693/K一、实验反思实验过程中，家兔在实验过程中发生死亡，在实验过程中每次取血后从动脉导管中反推肝素，而肝素并不是造成家兔死亡的主因。推测是由于反复逆流推送肝素，可能使心肌前负荷不稳定改变，心脏搏动异常，以至于发生心室肌颤动，这可能是实验过程中家兔的主要死亡原因。除此之外，也可能由于实验时程较长，不断取血，取血量过多后导致家兔缺血性休克的发生。