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1、细胞粘附分子与心脑血管疾病相关性的临床研究细胞粘附分子与心脑血管疾病相关性的临床研究［中图分类号1R285.5［文献标识码］B［文章编号］1005-0019(2009)7-0064-02作者简介:文正平(1962.11-),女，汉族，湖南常德桃源人,广东省韩山师范学院卫生所，西医，无学位大专学历，研究方向：西医临床。［摘要］目的:研究了不同类型心脑血管疾病患者体内可溶性细胞间粘附分子-］(sTCAM-1,solublelniercel］ularahdesinomoleeule_l)、可溶性血管粘附蛋白T(svAp-1,C反应蛋白(C,表达水
2、平变化以及它们间的相互关系)了解他们与不同类型老年心脑血管疾病的相关性，进一步阐明冠心病、脑梗塞等心、脑血管疾病发病机理，为该疾病的预防、治疗提供更为合理的科学依据。方法:通过EIJSA方法分别检测老年冠心病患者(包括稳定性心绞痛组及急性心肌梗塞组，分别简称为心绞痛组及心梗组)、脑梗塞患者及老年健康体检者血清SVAP-1.Sicam-1、CRP水平并进行组间比较，健康体检者为正常对照,每组选2广22例进行研究。结论：⑴以sICAM-1.sVAP-1为代表的细胞粘附分子及粘附蛋白、以CRP为代表的炎症因子在老年心脑血管疾病患者体内均较正常老年
3、人高，说明以上三指标对老年心脑血管疾病的发生、发展可能起促进作用。(2)sICAM-1、svAp-1及CRP三种指标以急性心肌梗塞患者体内水平为最高，稳定性心绞痛患者次之，脑梗塞患者最次，说明三指标表达水平与心脑血管疾病患者缺血程度、炎症坏死的严重程度有一定的关。［关键词］心脑血管；细胞粘附分子；sTCAM-11临床病例资料所有接受研究的心脑血管疾病患者均为2004年2月至2005年5月我院老年病科、心内科、神经内科部分就医老年病人，老年冠心病病例（所有观察对象诊断均符合WHO1979年诊断标准,并经冠脉造影或心电图及心肌酶谱的典型表现证实
4、）分为急性心肌梗塞组（以下简称心梗组）、稳定性心绞痛组（以下简称心绞痛组），老年脑梗塞组，脑梗死患者诊断均符合全国笫4届脑血管病会议制订的诊断标准，并均经颅脑CT或MRI检查证实。按按Admas方法，分为：大面积梗死4例,小面积梗死17例,其中心肌梗塞吋间平均（6.21）小吋,脑梗塞时间平均（6.71）个月，选择老年健康体检者（无冠心病、糖尿病、高血压史、血常规及生化正常）为正常对照组，每组观察对象为20例。临床研究过程中对合并有感染、免疫系统疾病、高血糖、高血脂的心脑血管疾病患者均排除在外。在标本采集与制备中，按患者入院先后顺序或门诊就诊
5、先后顺序无菌抽取被观察者清晨空腹静脉血2ml,形成血凝块后,2000/rhl离心20m分离血清,保存于-80°C冰箱屮集屮检测。正常对照组标本为健康者体检吋直接采取，标本处理同上。2方法人血清sVAP-1、sICAM-1.CRP酶联免疫定量检测，实验吋，所有样本常温复融，将所有样本顺序混乱并随机编号，进行相关指标的检测，检测时均设复孔，求其均值作为其水平。2.1血清sVAP-1测定方法:反应板每孔内包被有鼠抗人单抗，试剂盒内备有Biotin-conjugate抗sVAp-1单克隆抗体、sVAp-1标准品、链合素、洗涤缓冲液、分析缓冲液、底物
6、1、底物2、终止液。2.1.1建立标准曲线:设标准孔2组16孑L,每孔中各加入样品稀释液100ul,第一孔加标准品100ul,混匀后用加样器吸出lOOul移至笫二孔，如此反复作对倍稀释至第七孔，最后，从第七孔中吸出100ul-弃去，使之体积均为lOOulo笫八孔为空口对照。标准品浓度从笫一孔到第七孔分别为2、1、0.5、0.25、0❷125、0.0625、0.0313ong/mlo2.1.2加样与洗板、测定0D值:300ulI作液洗板2次、甩干加lOOul分析缓冲液至标准品孔加lOOul分析缓冲液至空口孔加90ul分析缓冲液至样本检测孔~待
7、测样品孔每孔各加入样品10ul加SOulBiot-niocnjugaet至各孔一将反应板置25°C水浴箱120分钟300ul工作液洗板4次、甩干加lOOul链合素至各孔将反应板置25°C水浴箱60分钟300ul工作液洗板4次、风干*加lOOul底物1、底物2的混和液〜将反应板置25°C水浴箱20分钟加lOOul终止液一轻轻混匀，即刻在酶标仪上直接测定波长为450nnl处的吸光度值。2・1・3结果判定:所有标准品和样品的0D值均应以空口对照调零。SVAP-1其浓度及对应的0D值见附表2.2.1建立标准曲线:设标准孔2组16孑L,每孔中各加入样
8、品稀释液lOOul,笫一孔加标准品lOOul,混匀后用加样器吸出lOOul移至第二孔，如此反复作对倍稀释至第六孔，最后，从第六孔屮吸出lOOul-弃去，使之体积均为lOOulo笫
