ABO 疑难血型鉴定情况分析-论文.pdf

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1、一119O～ChinJLabDiagn，July，2014，Vol18，No．7文章编号：10O7—4287(2014)07—119O一02ABO疑难血型鉴定情况分析黄璐，欧小懂，古力，刘丽华，黄炳坤。(1．河源市中心血站，广东河源517000；2．河源市人民医院，广东河源517000)ABO血型是输血医学中最重要的血型系统，AB0血型207bp，PCR扩增产物参考见表1。反应体系9l，试剂分4误定极易引发溶血性输血反应，由此造成贫血、肾衰竭、休克管扩增，采用热启动技术即95℃预温5min，然后95℃30S，甚至死亡。有资料显示ABO血型误定，

2、理论上导致无效输60。C30s，72℃90S进行3O个循环，72℃延伸5min进行扩血的可能>4[1]。因此，正确鉴定ABO血型是保障临床输增。PCR产物检测：3琼脂糖，10v／cm电泳35min。紫外血安全有效的前提。笔者就日常工作中发现的ABO定型困灯下凝胶成像确定结果。难的标本，以血清学为血型鉴定的基础，结合聚合酶链反应一表1PCR产物参数序列特异性引物扩增(PCR—SSP)方法进行ABO血型基因分型，解决了因血型正反定型不符而导致难以定型的难题，报告如下。1材料与方法1．1标本来源以往积累的ABO血型定型困难无偿献血者标本2O例(从37

3、264名献血者血液中发现)，医院送检标本1例，共212结果例样本。其中抗原减弱的3例献血者血液在街头纸板法初2．121例AB0疑难血型标本血清学检测结果见表2、表3。筛正定时均被误定为0型。表2提示抗一M抗体与非特异性冷凝集素是影响当地无偿献1．2血清学试剂与方法血者血液AB0血型，导致定型困难的主要因素。单克隆抗A、抗B、抗一IgG、筛选细胞与谱细胞均为上海表2血浆中存在不规则抗体导致ABO正反定型不符18例血液公司产品，抗A1、抗AB、抗H为美国Immucor公司产品，反定型红细胞为长春博德公司产品。血型正反定型、直接抗人球蛋白试验、抗体筛

4、选及鉴定试验、吸收放散试验、唾液血型物质凝集抑制试验参照文献方法[2]。1．3PCR-SSP基因分型第l8号为医院送检标本，常温条件下反应格局为：抗A4+采用QIAGEN试剂盒抽提样本基因组DNA，采用美国抗一B1+，Acl+Bc34-Ocl4-，DAT34-，自身对照l十，血浆G&T公司ABO基因PCR—SSP分型试剂盒进行常规等位基与谱细胞反应强度均一，考虑为自身抗体。经氯奎放散后红因分型，试剂盒可检测出A1、B、O1、A2014个等位基因，内细胞定型为A型。对照为扩增人类生长激素(HGH)基因的扩增产物，大小为表3亚型引起RBC表面抗原减

5、弱3例◇表示未做相应检测。2．2对被抗体致敏的18号标本及抗原减弱的19—21号标本抗体且红细胞未被致敏，排除ABH抗原异常的原因。进行AB0血型PCR-SSP基因分型验证，结果18、19、2O号为3讨论A／O1型，21号为B／01型，与血清学分型结果相吻合(见图AB0疑难血型常表现为：正定型与反定型不一致；血型“改变”，两次定型不一致；弱凝集，难判断+／一；与ABO“同型1)。1-17号标本未进行基因分型，因为在血清中找到不规则血”，交叉配血不合；与AB0“同型血”交叉配血“相合”，但输基金项目：2010年度河源市科技计划项目