温泉中降解纤维素嗜热细菌的分离与鉴定-论文.pdf

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1、第53卷第7期湖北农业科学Vo1．53No．72014年4月HubeiAgriculturalSciencesApr．，2014温泉中降解纤维素嗜热细菌的分离与鉴定梅凡Ia,lb，林白雪，赵超la,lb，刘斌la,lb,2(1．福建农林大学，a．食品科学学院；b．生物能源研究所，福州3500022．国家菌草工程技术研究中心．福州350002)摘要：采用纯培养的方法，从美国内迭华州温泉和中国福建永泰温泉分离得到27株嗜热细菌．从中筛选得到产纤维素酶的嗜热细茵并进行了16SrDNA鉴定。结果表明，LY7和LY8是产纤维素酶的嗜热细菌。菌株LY7与脂环酸芽孢杆

2、菌属(Aficyclobacillus)的同源性达到99％．菌株IJY8与土芽孢杆菌属(GeobaciUus)的同源性达到99％，生长温度范围在40～70oC之间，最适温度65oC酶学性质分析表明，LY8的内切酶酶活高达145IU／mL关键词：温泉；嗜热细菌；热稳定纤维素酶；分离；鉴定中图分类号：Q939．9；Q93—331文献标识码：A文章编号：0439—8114(2014)07—1516—04IsolationandIdentificationofThermophilesDegradingCelluloseinHotSpringMEIFanh，1b，

3、LINBai—xue1a，ZHAOChao1a一，LIUBinh，t(1a．CollegeofFoodScience；lb．InstituteofBioenergy，FujianAgricuhureandForestryUniversity，Fuzhou350002，China2．ChinaNationalEngineeringResearchCenterofJuneaoTechnology，Fuzhou350002，China)Abstract：Culture-basedapproachwasusedtoisolatethermophilesfromh

4、otspring．Intotal，27thermophilicbacterialstrainswereisolatedfromhotspringsinNevadaofUSAandYongtaihotspringinFujianprovinceofChina．Superiorcelluloseandhemicellulosedecomposingstrainswerescreenedandidentifiedby16SrDNA．TheresultsshowedthatLY7andLY8degrad—ingcellulosewereindentifiedas

5、Alicyclobacillussp．LY7andGeobaciUussp．LY8．Geobacillussp．LY8couldbecuhuredattemperaturerangingfrom40℃to70oC．withtheoptimaltemperatureof65℃．The-glucosidaseactivityofLY8was145IU／mL．Keywords：hotspring；thermophiles；thermostablecellulase；separation；identification纤维素酶是一类能够将纤维素降解为葡萄糖通常分布

6、在地热环境和人工高温环境中．如温泉、的多组分酶系的总称根据酶的功能差异分为三地热区土壤、深海火山口、深海热液区以及高温堆类：①内切葡聚糖酶(EC3．2．1．4)；②外切葡聚糖酶肥、热水器等环境_6]嗜热菌产生的热稳定酶具有耐(Ec3．2．1．91)；③B一葡萄糖苷酶(Ec3．2．1．21)。热性、高效性以及对有机溶剂、去污剂和变性剂的纤维素酶降解纤维素是酶系各组分之问协同作用较强抗性，在食品、医药、生物质能源、生物工程及的结果首先由内切葡聚糖酶在纤维素分子内部非废物处理等方面都得到广泛的应用。其中，热稳定结晶区进行随机的酶切产生小分子的纤维素．然后的纤维

7、素酶在纤维素的转化中有着重要的应用价由外切葡聚糖酶以纤维二糖为单位从纤维素线性值。研究表明，许多高温菌具有分解纤维素的能力，末端进行水解．每次切下一个纤维二糖分子．最后如芽孢杆菌属(Bacillus)、梭状芽孢杆菌属(Clostridi—由f3-葡萄糖苷酶将纤维二糖以及短链纤维寡糖水Mm)、脱硫肠状菌属(Desulfotomaculum)、热酸杆菌解成葡萄糖[3_5]属的解纤维素热酸杆菌(Acidothermuscellulolyticus)、嗜热菌是一类能在45℃以上生长和繁殖的极喜热菌属fCa／o0r)的厌氧和分解纤维素高温菌端环境微生物，包括部分细

8、菌、古菌和真菌三大类，NA10菌株【8]由于高温有利于纤维素的降解，而高收稿日期