不同荧光RT-PCR试剂盒检测H7亚型禽流感病毒的比较-论文.pdf

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1、不同荧光RT-PCR试剂盒检测H7亚型禽流感病毒的比较郑丽兰,张海明,张海冰,沈丹,段晓冬(广州市动物疫病预防控制中心,广东广州510440)摘要:[目的]比较评价4种H7亚型禽流感病毒荧光定量PCR试剂盒检测结果的差异。[方法]同时用4种H7亚型禽流感病毒荧光定量PCR试剂盒对已知结果的抗原和145份家禽泄殖腔棉拭子进行检测,并对检测结果进行比较分析。[结果]WHO推荐的方法和厂家A的检测试剂盒的灵敏度最好,在将H7禽流感抗原稀释至1:10时均能检测到禽流感病毒;而厂家B的试剂盒在抗原浓度1:10以上时均能检测到禽流感病毒,但在1:10至1:10一的稀释度则只能判定为可疑,需要进行重新检

2、测;厂家C的H7亚型禽流感病毒检测试剂盒的灵敏度更差,只在抗原浓度1:10。以上时显示阳性,抗原浓度为1:10和1:10、时均不能检测到H7亚型禽流感病毒。另外,4种试剂盒均表现出较好的特异性和重复性。f结论]不同厂家H7亚型禽流感病毒检测试剂盒的灵敏度等方面存在一定差异,WHO推荐的H7亚型禽流感病毒检测方法和厂家A的总体性能优于试剂盒B和C,适于临床检测与筛查。关键词:禽流感病毒;H7亚型;荧光RT-PCR;比较中图分类号:$852.659.5;$859文献标识码:B文章编号:1005—944X(2014)09.0073—04Comparisonofdifferentreal-time

3、RT-PCRkitsfordetectionofH7subtypeavianinfluenzavirusZhengLilan,ZhangHaiming,ZhangHaibing,ShenDan,DuanXiaodong(GuangzhouAnimalDiseasePreventionandControlCenter,Guangdong,Guangzhou,510440)Abstract:[Objective】TocompareandevaluatetheefficacyofthefourrealtimeRT_PCRdiagnostickitsforH7avianinfluenzavirus

4、.【Methods】TheH7subtypeantigenand145cloacalswabsofpoultrywithknownresultsweredetectedbythefourkits(theWHOrecommendedkit,KitA,KitBandKitC)andtheirresultswerestatisticallyanalyzed.IResult1TheWHOrecommendedmethodandKitAhadthehighestsensitivityindetectionofH7viruswiththedilutionof1:10。/.Theviruscouldbe

5、detectedattheantigenconcentrationabove1:10and1:10byKitBandKitCrespectively~Theviruscouldnotbedetectedwhentheantigendilutionwas1:10and1:10usingKitCshowingthelowestsensitivity.However,allthefourkitsshowedgoodspecificityandrepeatability.[ConclusionlDifferentkitsforH7subtypeavianinfluenzavirushaddiffe

6、rentperformanceofsensitivity.TheoverallperformanceoftheWHOmethodandKitAwasbe~erthantheothertwokitsinscreeningandclinicalsurveillance.Keywords:avianinfluenzavirus:H7subtype:rea1.timer_PCR;comparison2013年2月以来,我国浙江、江苏、广东等H7N9亚型禽流感起到了十分重要的作用。众所周十多个省份相继出现人感染H7N9亚型禽流感病毒知,采取相应的措施控制疫情扩散的前提之一即为的事件[1-2],截止到

7、2013年lO月25日,已经造成快速、准确地对疫情进行检测和确诊。由于H7N9137人感染,其中45人死亡[3-6]。该事件给我国养亚型禽流感感染家禽后不表现明显的临床症状“]禽业造成了巨大的经济损失[7-91。同年5月18日,,因此,利用实验室检测方法对其进行及时检测我单位在日常例行监测工作中,在广州市增城某和确诊显得尤为重要,而荧光RT-PCR方法作为一市场检测到H7N9亚型禽流感病毒,并及时采取相项快速、高度敏感、

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