国产与进口重组酵母乙型肝炎疫苗免疫小鼠早期细胞免疫应答的比较-论文.pdf

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1、中国生物制品学杂志2014年6月第27卷第6期ChinJBiologicalsJune2014，Vo1．27No．6·737·疫苗研究国产与进口重组酵母乙型肝炎疫苗免疫小鼠早期细胞免疫应答的比较何鹏，邱少辉，方鑫，钟熙，梁争论，沈琦，胡忠玉中国食品药品检定研究院卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室，北京100050摘要：目的比较国产与进口重组酵母乙型肝炎疫苗免疫小鼠早期细胞免疫应答的差异。方法取批签发合格的国产疫苗1和2(酿酒酵母)、进口疫苗1(酿酒酵母)、国产疫苗3和4(汉逊酵母)、进口疫苗2(汉逊酵母)各3批，经背部皮下免疫BALB／c小鼠，3g／(100l一只)，于免疫后7

2、d，处死小鼠，无菌取脾，制备脾细胞悬液，分离脾单个核细胞(mononuclearcell，MNC)。采用酶联免疫斑点(enzymelinkedimmunospotassay，ELISPOT)法测定小鼠MNC体外接受HBsAg刺激后产生的抗原特异性细胞因子IFN~／、IL-2、IL4和IL-5水平及体外接受MHCI类多肽s28∞刺激后产生的IFN3,水平。结果小鼠免疫酿酒酵母乙肝疫苗后，以HBsAg刺激MNC，国产疫苗1诱导产生的IFN',／、IL．2和IL．4水平均明显高于国产疫苗2和进口疫苗1，国产疫苗1和2诱导的IL．5水平均明显高于进口疫苗1(P均<0．05)；以s．刺激MNC，3种

3、疫苗诱导产生的IFN3,水平差异均无统计学意义(P>0．05)。小鼠免疫汉逊酵母乙肝疫苗后，以HBsAg或s勰。刺激MNC，进口疫苗2诱导的IFNy和I4水平均明显高于国产疫苗3(P<0．05)；3种汉逊酵母乙肝疫苗诱导的IL．2和IL．5水平差异均无统计学意义(P>0．05)。结论国产重组酵母乙肝疫苗诱导早期细胞免疫应答能力较好。关键词：乙型肝炎；疫苗；酶联免疫斑点法；细胞免疫中图分类号：R373．2+1R392．33文献标识码：A文章编号：1004—5503(2014)06，0737．06Earlycellularimmuneresponseinducedbydomesticandim

4、portedrecombinanthepatitisBvaccinespreparedwithyeastcellsinmiceHEPeng，QIUShao—hui，FANGXin，ZHONGXi，LIANGZheng-1un，SHENQi，HUZhong-yuNationalInstitutesforFoodandDrugControl，Beijing100050，ChinaCorrespondingauthor：HUZhong-yu，E-，nall：huzy67@163．comAbstract：ObjectiveTocomparethedifferenceofdomesticandimp

5、osedrecombinanthepatitisB(HB)vaccinespre—paredwithyeastcellsininductionofcellularimmuneresponseinmice．MethodsDomesticHBvaccines1and2(Saccharomycescerevisiae)，importedvaccine1(Saccharomycescerevisiae)，domesticvaccines3and4(Hausenulapolymorpha)andimportedvaccine2(Hansenulapolymorpha)，threebatchesfor

6、each，wereinoculateds．c．intoBALB／cmice，3g／100txlforeach．Themicewerekilled7dafterimmunization，ofwhomthespleenswerecollectedasepticallyandpreparedintosplenocytesuspensionfromwhichmononuclearcells(MNCs)wereisolated．HBsAgantigenspecificIFN',／，IL一2，IL-4andIL一5levelsproducedbyMNCsafterstimulationinvitrow

7、ithHBsAgaswellastheIFNylevelafterstimulationinvitrowithMHCIpolypeptideS28．39weredeterminedbyenzymelinkedimmunospotassay(ELISPOT)．ResultsTheIFNy．IL一2andIL一4levelssecretedbyMNCserstimulationinvitrowithHBsAginthemic