外源性 TGF-β1对原代急性早幼粒细胞白血病细胞凋亡的影响及机制探讨-论文.pdf

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1、山东医药2014年第54卷第11期外源性TGF—I3。对原代急性早幼粒细胞白血病细胞凋亡的影响及机制探讨王蕾，李艳(中国医科大学附属第一临床医院，沈阳1lOOO1)摘要：目的观察外源性转化生长因子B(TGF一13)对原代急性早幼粒细胞白血病细胞(APL)凋亡的影响，并探讨其可能机制。方法将APL细胞分为4组，对照组不加任何药物，实验组用终浓度为t、5、10ng／mLTGF．13处理(实验1、2、3组)，分别处理24、48、72h，采用瑞氏一吉姆萨染色法检测细胞凋亡，流式细胞仪检测细胞周期，免疫组化法检测TGF-p】、P27、CyclinE、bcl一2蛋白，RT—PCR技术检测TG

2、F一13l、P27、CyclinE、bcl-2mRNA。结果与对照组比较，实验1、2、3组24、48h细胞凋亡率升高(P均<0．05)；与同组24h比较，实验1、2、3组48h细胞凋亡率升高(P均<0．05)。对照组细胞培养48h未见明显细胞周期阻滞；与对照组比较，实验1组48h细胞周期阻滞于G。期，实验2、3组APL细胞周期明显阻滞于G期。与对照组比较，实验2组TGF-13，、P27蛋白水平升高，CyclinE、bcl-2蛋白降低(P均<0．05)。1、23-actin条带亮度相同，实验2组(2道)P27p1mRNA条带亮度与对照组(1道)相同，P27plmRNA水平较对照组变

3、化不明显；1、213一actin条带亮度相同，实验2组(2道)条带亮度明显高于对照组(1道)；实验2组CyclinE条带与对照组比较亮度减低，CyclinE表达下调。结论外源性TGF一13．通过上调TGF-B、P27及下调CyclinE、bcl-2作用，诱导细胞发生凋亡，使细胞阻滞于G期。关键词：转化生长因子p1；细胞凋亡；细胞周期；P27蛋白；CyclinE蛋白；bcl-2蛋白doi：10．3969／j．issn．1002-266X．2014．11．007中图分类号：R733．7文献标志码：A文章编号：1002-266X(2014)11-0022-04Efectofexogen

4、eticTGF一131onapoptosisofprimaryacutepromyelocyticleukaemiacellsandthemechanismⅣG￡．L／Yah(The￡HospitalofChinaMedicalUniversity，Shenyang110001，China)Abstract：ObjectiveToobservetheeffectofexogeneticTGF一131onapoptosisofprimaryacutepromyelocyticleukae-mia(APL)cellsandtoinvestigatethemechanism．Metho

5、dsAPLcellsweredividedinto4groups：thecontrolgroup，theexperimentalgroups1，2and3．Thecontrolgroupwasnottreatedwithanydrugs，buttheexperimentalgroups1，2and3wereseparatelytreatedwithTGF一131attheconcentrationsof1，5，and10ng／mLfor24，48and72h．Theapoptosiswasde—tectedbySwiss—Jimstainingmethodandcellcycle

6、wasdetectedbyflowcytometry．TheexpressionofTGF—pl，P27，Cyc—linEandbc1-2proteinandmRNAinAPLcellswasdetectedbyirmnunohistochemistryandRT—PCR．ResultsComparedwiththecontrolgroup，theapoptosisrateoftheexperimentalgroups1，2and3at24hand48hwasincreased(allP<0．05)；ineachgroupexceptthecontrolgroup，theapop

7、tosisrateat48hwashigherthanthatat24h(allP<0．05)．Inthecontrolgroup，afterbeingculturedfor48h，nocellcyclearrestwasshown；comparedwiththecontrolgroup，afterbeingcul·turedfor48h，thecellcycleofAPLceHsintheexperimentalgroup1wasblockedinG1stageandthece