温清饮对HaCaT细胞增殖和分化的影响.pdf

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1、—2174一中国中医急症2014年l2月第23卷第12期JETCM.Dec.2014,Vo1.23,No.12·研究报告·温清饮对HaCaT细胞增殖和分化的影响术于春水杨和荣蒋亚辉万焰胥兴文(四川省遂宁市中心医院.四川遂宁629000)中图分类号:R733.7文献标志码:A文章编号:1004—745X(2014)12—2174—03doi:10.3969~.issn.1004-745X.2014.12.011【摘要】目的观察温清饮对HaCaT细胞增殖和分化的影响。方法用细胞体外培养技术检测温清饮对Ha.CaT细胞增殖和分化的影响。结果温清饮对HaCaT

2、细胞的增殖具有抑制作用,最小抑制浓度为5mg/mL,呈现剂量依赖的关系。温清饮影响HaCaT细胞FLG基因的表达,经温清饮处理48h后的HaCaT细胞其FLGmRNA的表达水平明显高于对照组。结论温清饮对HaCaT细胞的增殖具有抑制作用并上调HaCaT细胞FLGmRNA的表达。【关键词】温清饮HaCaT细胞增殖分化EfectsofWenqingyinontheProliferationandDiferentiationofHaCaTCellsYUChunshui,YANGHerong,J~ANGYahui,eta1.SuiningCentralHosp

3、ital,SichuanProvince,Sichuan,Suining629000,China【Abstract】Objective:ToinvestigatetheeffectsofWenqingyinontheproliferationanddifferentiationofHaCaTcells.Methods:CulturedHaCaTceilsinvitrowereusedtotesttheeffectsofWenqingyininvariousdurationsontheProliferationandDifferentiationofHa

4、CaTCells.ThecellproliferationwasassessedwithCCK-8method,thechangesoffilaggrin(FLG)mRNAexpressionsbysemi—quantitativereversetranscriptionPCR.Results:Thepro—lirerationofHaCaTcellswasinhibitedbythetreatmentwithWenqingyinwiththeminimuminhibitingconcentra.tion5mg/mL,andtheinhibitionr

5、aterosewiththeincreaseofthedosage.whichwasdose—dependent.WiththeuseofWenqingyin,themRNAexpressionofFLGwashigherthanthatofthecontrolgroup.Conclusion:Wen-qingyincaninhibittheproliferationandinducethedifferentiationofkeratinocytes.【Keywords】Wenqingyin;HaCaTcells;Proliferation;Difer

6、entiation特应性皮炎(AD)是以病变皮肤剧烈瘙痒为主要逆转录试剂盒(美国Thermoseientific公司),PremixEx表现,该病发病率呈逐年上升趋势,且复发率高,严重Taq(大连宝生物工程有限公司).20bpDNAladder影响了患者的生活质量。该病病因和发病机制不明,研Marker(大连宝生物工程有限公司),DNAloading究表明,AD的发病机制涉及到皮肤屏障功能、天然免buffer(上海生工公司),引物由上海生工公司合成。疫系统和获得性免疫系统的相互作用、相互影响和相1.2治疗方法(1)温清饮提取液的制备:称取白芍互制约⋯。

7、20g,当归20g,熟地黄20g,川芎20g,黄连10g,黄芩中医药在治疗AD、湿疹等皮肤功能障碍性皮肤10g,黄柏10g,栀子1Og,加1O倍蒸馏水浸泡30h,病方面疗效独特。我们的前期研究发现.川I芎嗪(川芎煎煮2h,纱布过滤取滤液,用旋转蒸发仪将之浓缩,调的主要成分)可抑制HaCaT细胞中FGF10mRNA的表pH至7.O左右.0.22txm无菌滤器过滤药液,分装至达_2]。当归多糖(当归的主要成分)对HaCaT细胞的增5mL离心管中密封,4℃冰箱中保存备用。(2)CCK一8殖具有显著抑制作用[]。而当归、川芎是温清饮的重要法检测细胞增殖状态:取

8、对数生长期的人HaCaT细胞,组成成份,提示温清饮对HaCaT细胞增殖、分化的可能稀释成密度为

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