嗜水气单胞菌Aer毒素和胞外蛋白酶卵黄抗体的制备.pdf

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1、江苏农业学报(JiangsuofAgr．Sci．)，2012，28(1)：135～139王帅兵，熊良伟，朱善元，等．嗜水气单胞菌Aer毒素和胞外蛋白酶卵黄抗体的制备[J]．江苏农业学报，2012，28(1)：135—139嗜水气单胞菌Aer毒素和胞外蛋白酶卵黄抗体的制备王帅兵，熊良伟，朱善元，于生兰，徐建生。，吴海波。(1．江苏畜牧兽医职业技术学院，江苏泰州225300；2．江苏省兽用生物制药高技术研究重点实验室，江苏泰州225300；3扬州大学兽医学院，江苏扬州225009)摘要：为克服嗜水气单胞菌不同血清型对卵黄抗体免疫保护效果的影响，从嗜水气单胞菌中

2、提取其主要致病因子Aer毒素和胞外蛋白酶(ECPase)，验证其生物学活性，分别免疫蛋鸡。用辛酸一硫酸铵法粗提卯黄抗体，用间接ELISA法测其效价、鉴定抗体与不同来源嗜水气单胞菌主要致病因子的交叉反应。结果表明，抗Aer毒素和抗ECPase卵黄抗体效价最高分别可达1：2”和1：2，与其他来源嗜水气单胞菌交叉反应性强。关键词：嗜水气单胞菌；Aer毒素；胞外蛋白酶；卵黄抗体；交叉反应性中图分类号：$943．411文献标识码：A文章编号：1000-4440(2012)01-0135-05Preparationofchickeneggyolkimmunoglobu

3、lincontainingantibodyagainstAertoxinsandECPasesinAeromonashydrophilaWANGShuai．bing，XIONGLiang—wel。。，ZHUShan．yuan，YUSheng．1an，XUJian．sheng。，WUHa1．bo(1．JiangsuAnimalHusbandryandVeterinaryCollege，Taizhou225300，China；2．JiangsuProvincialKeyLaboratoryofVeterinaryBio-pharmaceuticalHigh—t

4、echResearch，Taizhou225300，China；3．CollegeofVeterinaryMedicine，YangzhouUniversity，Yangzhou225009，China)Abstract：InordertOavoidtheinflenceofserotypingofAeromonashydrophilaonyolkimmunoglobulin(1gY)，AertoxinandECPaseofAeromonashydrophilawereextractedandidentifiedfollowedbybeingimmuned

5、tolayerchickens．IgYineggyolkswasseparatedwithoctoicacid—ammoniumsulfate．IndirectELISAwasusedtoassaythetiterofIgYandthecross—reactivitytodifferentAertoxinsandECPasesfromdifferentsources．ThetiteroftheIgYtoAertoxinsandECPasepeakedat1：2and1：2．respectively．Strongcross—reactionswereshow

6、edbetweenIgYanddifferentAertoxinsorECP∞esfromothersourcesKeywords：Aeromonashydrophila；Aertoxin；ECPase；IgY；cross—reactivity嗜水气单胞菌Aeromonashydrophila)是一类广效差，而且易引起药物残留，给水产养殖造成巨大经泛存在于水环境的常在菌，是中国淡水养殖鱼类暴济损失。特异性卵黄抗体(Eggyolkimmunoglobu．发性出血病等细菌性疾病的主要病原，水产生产1in，IgY)可治疗由细菌或病毒感染引起的疾病，具过程中由其引

7、起的疾病危害种类多、流行范围广、死有安全无残留、不产生耐药性、价廉易得等优点，是亡率高，传统的抗生素药物治疗用量大、成本高、疗一种具有广阔应用前景的抗生素替代品。然而，嗜水气单胞菌的血清型较多，其暴发和流行往往表现收稿日期：2011-06—12出一定的优势血清型_4J，因此造成以嗜水气单胞菌基金项目：江苏畜牧兽医职业技术学院2009年院级重点课题菌体为免疫原制备的IgY，在生产实践中对血清型(ZD200907)不同嗜水气单胞菌所致败血症的治疗效果不理想。作者简介：王帅兵(1979一)，女，湖北黄梅人，硕士，讲师，主要从事抗若以嗜水气单胞菌的主要致病因子作为

8、免疫原制备体研究与药物残留分析工作。(E-mail)wicewin