牦牛肝脏蛋白对人肝癌HepG2细胞增殖及凋亡的影响.pdf

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1、中国生物制品学杂志2013年12月第26卷第12期ChinJBiologicalsDecember2013.Vo1.26N0.12·l789·治疗性:制齐IJ牦牛肝脏蛋白对人肝癌HepG2细胞增殖及凋亡的影响郭洁,柳青海,李天才-1.中国科学院西北高原生物研究所,青海西宁810008;2.中国科学院大学,北京100049摘要:目的检测牦牛肝蛋白BGP对人肝癌HepG2细胞增殖及凋亡的影响,并探讨其体外抗癌活性。方法用不同浓度的BGP分别作用于人肝癌HepG2细胞,作为实验组,同时设未处理细胞对照组和空白对照组,采用MTr法检测BGP(25、50和100mg/L)作用HepG2

2、细胞12、24、36和48h对细胞增殖活性的影响,并于倒置显微镜下观察细胞形态变化;采用流式细胞仪检测BGP(25、50、75、100mg/L)作用HepG2细胞24h,对细胞周期及凋亡的影响。结果不同浓度的BGP均可抑制HepG2细胞增殖,与未处理细胞对照组相比,差异均有统计学意义(P<0.05),其中100mg/LBGP作用48h,对HepG2细胞抑制率最高(94.99%)。各浓度BGP实验组HepG2细胞形态发生明显改变,细胞间隙加大,细胞间连接不牢固,胞内颗粒增多,呈现生长受阻状态,甚至有细胞脱落,细胞数目减少,其中100mg/LBGP作用48h,凋亡细胞明显增多。不

3、同浓度BGP作用HepG2细胞24h后,均可不同程度抑制HepG2细胞生长并诱导细胞凋亡;与未处理细胞对照组相比,s期细胞比例明显升高(除25mg/LBGP实验组),GO/G1期和G2/M期细胞比例明显下降,差异均有统计学意义(P<0.05o结论牦牛肝蛋白BGP可抑制HepG2细胞增殖,并促进凋亡,具有明显的体外抗肝癌活性。关键词:牦牛;肝脏蛋白;HepG2细胞;细胞增殖;细胞凋亡中图分类号:R735.7R730.54文献标识码:A文章编号:1004.5503(2013)12—1789—05Eflfect0fyakliverproteinonproliferationanda

4、poptosisofhumanhepatocarcinomaHepG2cellsGUOJie,LIUQing—hai,LITian—caiNorthwestInstituteofPlateauBiology,ChineseAcademyofScience,Xining810008,QinghaiProvince,ChinaCorrespondingauthor:LITiau—cai,E-mail:tcli@nwipb.co$.caAbstract:ObjectiveToinvestigatetheinvitroantitumoractivityofyak(Bosgrunnis

5、ens)liverproteinBGPaswellasitseffectonproliferationandapoptosisofhumanhepatocarcinomaHepG2cells.MethodsHepG2cellsweretreatedwithBGPatvariousconcentrations,usingthoseuntreatedasnegativecontro1.Blankcontrolwassetup.TheproliferativeactivitiesofHepG2cells12,24,36and48haftertreatmentwith25,50and

6、100mg/LBGPweredeterminedbyM1Tassay,whilethemorphologieswereobservedunderinvertedmicroscope.ThecellcycleandapoptosisofHepG2cells24haftertreatmentwith25,50,75and100mg/LBGPweredeterminedbyflowcytometry.ResultsTheproliferationsofHepG2cellstreatedwithBGPatvariousconcentrationswereinhibitedsignif

7、icantlyascomparedwiththoseuntreated(P<0.05)。ofwhichtheinhibitionratereachedthemaximum(94.99%)48haftertreatmentwith100mg/LBGP.ThemOF-phologiesofHepG2cellsinvarioustestgroupschangedsignificantly,expressedasincreasedspaceandloosejunctionbe—tweencells,increa

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