双波长分光光度法测定银杏叶中直链淀粉、支链淀粉含量.pdf

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1、江苏农业科学2014年第42卷第4期-——275-．——焦铭，李笔，孙雪，等．双波长分光光度法测定银杏叶中直链淀粉、支链淀粉含量[J]．江苏农业科学，2014，42(4)：275—276双波长分光光度法测定银杏叶中直链淀粉、支链淀粉含量焦铭，李笔，孙雪，黄俊潮(湖北科技学院基础医学院，湖北咸宁437100)摘要：采用双波长分光光度法检测银杏叶中直链淀粉、支链淀粉含量。利用淀粉与碘反应的显色作用绘制淀粉紫外吸收曲线，选择直链淀粉检测波长为462、610Flm，支链淀粉检测波长为516、728nm，根据标准样品的回归方程可得到直链淀粉、支链淀粉含量。双波长分光光度法检测银杏叶中

2、直链淀粉、支链淀粉含量，操作简单，重复性高，可用于工业上批量检测。关键词：双波长分光光度法；直链淀粉；支链淀粉；银杏叶中图分类号：R284．1文献标志码：A文章编号：1002—1302(2014)04—0275—02银杏(GinkgobilobaL．)属于裸子植物，是银杏科银杏属1．1材料唯一存在的物种，是我国珍贵的植物资源”。银杏的药用价银杏叶取材于湖北省安陆市银杏国家公园植物研究所。值主要体现在银杏叶成分，银杏叶中淀粉含量是其自身营养直链淀粉、支链淀粉标准样品(美国Sigma公司)；无水乙物质，决定了其他成分的含量和比例J。测定银杏叶中淀粉醇、碘化钾、氢氧化钾、乙醚、氯

3、化钾、碘、石油醚、盐酸(均为含量，有助于了解银杏药用成分的构成比，提高药用价值。淀市售分析纯)。粉可分为直链淀粉、支链淀粉，支链淀粉含量越高，银杏叶品1．2仪器设备质越高。以往的淀粉测定方法只能得到总淀粉量，无法区分UV一2550紫外一可见分光光度计(岛津有限公司)。直链淀粉和支链淀粉。本研究利用双波长分光光度法，直接、1．3方法准确测定了银杏叶中直链淀粉、支链淀粉含量，以期为工业上1．3．1溶液制备直链淀粉、支链淀粉标准溶液配制：称取批量检测银杏淀粉含量提供依据。2种淀粉样品各0．1g，转移至100mL烧杯中，加入2mol／L氢氧化钾溶液10mL，溶解后移到容量瓶，加蒸馏

4、水定容到1材料与方法100mL，分别得到1g／L直链淀粉、支链淀粉标准溶液。碘溶液配制：按常规方法配制2g／L碘试剂，储存于棕色收稿日期：2013—10—04瓶中待用。基金项目：湖北省教育厅科学研究计划(编号：B2013050、1．3．2样品处理采用酸式提取法提取银杏叶中的淀Q20122802)；湖北科技学院国家级大学生创新创业训练计划(编粉，提取条件：亚硫酸浓度0．19％，液固比7mL：1g，浸提时号：201210927025)。间16h。提取淀粉的工艺流程为：称取10g银杏叶，将银杏作者简介：焦铭(1977一)，男，湖北武汉人，博士，讲师，主要从事植叶用蒸馏水反复清洗3

5、次，剪去主脉、支脉，在粉碎机中将银物分子遗传学研究。E—mail：jiaoming@whu．edu．cn。通信作者：黄俊潮，主要从事植物生物化学研究。E—mail：jehuang77杏叶样品磨成粉末，加入亚硫酸溶液进行匀浆，用研磨器将匀@163．。o硼。浆液研磨呈糊状，用325目筛过筛，5000r／nfin离心10min，参考文献：[2]2011(20)：13．章强，家安．应关注农药中掺加隐性成分问题[J]．农药市[1]杨光．杀虫剂添加隐性成分现象严重[J]．农药市场信息，场信息，2008(2)：40．-——276．——江苏农业科学2014年第42卷第4期弃上清，沉淀用无水

6、乙醇、丙酮、乙醚反复洗涤，直至上清液变成无色。40℃干燥，研磨后用60目过筛，将银杏叶粉末用纱布包裹并保存待用。1．3．3双波长直链淀粉标准曲线分别吸取0．240．4、0．6、0．8、1．0、1．2、1．4、1．6mL直链淀粉标准溶液，放入不同的50mL容量瓶。向每个容量瓶中加入30mL蒸馏水，用0．1mol／L盐酸调节pH值至3，加入0．5mL碘试剂，用蒸馏水定容至50mL。静置15min，在A、A波长下分别测定吸光度(D^1、D)，即得ADn=D一D以AD直为纵坐标，直波长㈣，链淀粉浓度为横坐标，绘制双波长直链淀粉标准曲线。图1作图法确定双波长1．3．4双波长支链淀粉标

7、准曲线分别吸取1．5、2．0、2．5、3．0、3．5、4．0、4．5、5．0mL支链淀粉标准溶液，其他流程同上。1．3．5直链淀粉、支链淀粉含量测定称取0．1g处理过的淀粉样品，加入0．5mol／L氢氧化钾溶液10mL，溶解后转人100mL容量瓶，用蒸馏水定容。取样品液2．5mL，调节pH值为3，加人碘试剂，定容静置。分别测定波长为A。、A、A，、A下的吸收值D^l、D^】、DD^‘'得到AD直、AD支。分别在直链淀粉、支链淀粉标准曲线中查询，可计算出样品中直链淀直链淀粉浓度(g／1粉、支链淀粉含量。0．452结果