高分辨率熔解曲线分析应用的研究进展.pdf

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1、中国畜牧兽医2013年第4O卷第8期生理生化·1O5·高分辨率熔解曲线分析应用的研究进展刘自增。吴周良，阎萍，王一文(1．天津市奶牛发展中心，天津300384；2．中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所畜牧研究室，甘肃兰州730050)摘要：高分辨率熔解曲线分析(high—resolutionmeltingcurveanalysis，HRMA)是结合饱和荧光染料、未标记探针和实时荧光定量PCRN-~oN的检测基因突变与基因分型的分子诊断技术，具有高通量、低成本、简单快捷、结果准确、灵敏度和特异性高及真正闭管操作等优点。作者就高分辨率熔解曲线分析应用的研究进展进行

2、综述。关键词：突变检测；熔解曲线分析；核酸中图分类号：$816．79文献标识码：A文章编号：1671—7236(2013)08—0105—07高分辨率熔解曲线分析(high—resolutionmelt—简单灵活、成本低、闭管操作和无需凝胶电泳等优ingcurveanalysis，HRMA)技术是近年来国际上最点，可应用于核酸突变扫描、基因分型、甲基化检测、新兴起的核酸研究新手段，饱和DNA荧光染料的短串联重复序列分析、序列匹配和RNA编辑等多出现和仪器设备的进步是其出现的基础。HRMA方面研究，已越来越受到国内外核酸分子实验室的技术无需使用荧光标记探针，不

3、受突变种类和突变欢迎和重视。位点的限制，具有高灵敏度和特异性、高通量、操作1HRMA技术原理与特点1．1HRMA技术原理HRMA概念最早于1970收稿日期：2013-03—06年提出(Guttmann等，1977)，主要是基于核酸分子作者简介：刘自增(1981一)，男，山东人，硕士，研究实习员，研究的片段长度、GC含量和分布等物理性质的不同，通方向：动物遗传育种与繁殖。过实时监测升温过程中双链DNA荧光染料与PCR通信作者：阎萍(1963一)，女，山西人，研究员，博士生导师，主要扩增产物的结合情况来实现的。当待测PCR产物从事动物遗传育种研究。基金项目：国家

4、肉牛牦牛产业技术体系(CARS-38)；青年科学基中存在碱基错配时，升温后错配部分的DNA双链金项目(31101702)。就会最先解开，荧光染料从解链部分率先脱落下来，CAIHong，LILi，YINZhong—qiong，LIMan，DAIRu—yi，KANGShuai，PENGLian—ci，QuJing，HUTao(CollegeofVeterinaryMedicine，SichuanAgriculturalUniversity，Ya’an625014，China)Abstract：TheexperimentwasconductedtoscreenCh

5、inesemedicinewhichhadgoodantibacterialeffectinvitroofRieme—rell口n口tipestr．ToextracttheeffectivecomponentofCortexEucommiaeandothertraditionalChinesemedicinewerebymeansofultrasonicprocessing，ethanolandwaterbathheating，usingtubedoubledilutionmethodtOdeterminingtheminimalinhibitorvconc

6、entration(MIC)andminimalbactericidalconcentration(MBC)oftheextractsagainstRiemerellaanatipestifer，determingtheeffectontheunitedbacteriostasisextractsoftraditionalChinesemedicineonRiemerellaanatipestiferthroughthechessboardmethod．TheresultsshowedthattheMICrangedfromtheextractsofCort

7、exEucommiaeandotherChinesemedicinesonRiemerellaanatipest佬rwere15．60tO250．00mg／mL．TheMICofCortexEucommiae，RadixetRhizomaRh8i。RndizIs口tidis，FructusCitriSarcodactylis，CortexFraxiniandIsatidisFoliumwereall15．60mg／mL．ButtheMICofFlosLoniceraeJapnicae，RhizomaCurcumaeLongae，RadixScutellari

8、ae，RadixAstragalusandRadix