柞蚕蛹虫草水提物对人乳腺癌细胞MCF-7增殖和凋亡的影响.pdf

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1、中国奄让2014，35(3)：23-26ChinaSeticuIture·科学试验·柞蚕蛹虫草水提物对人乳腺癌细胞MCF-7增殖和凋亡的影响岳冬梅王林美李树英(辽宁省农业科学院大连生物技术研究所，辽宁大连116024)摘要研究柞蚕蛹虫草水提物(Aqueousextractfromcordycepmilitarisofantheraeapernyi，AEoAPC)对人乳腺癌细胞MCF一7生长抑制与凋亡的作用。将不同浓度的AEoAPC分别作用于人乳腺癌细胞MCF一724、48、72h后，应用倒置相差显微镜观察人乳腺癌细胞MCF-7的形态变化，噻唑蓝比色法测定细胞生长抑制效应，流

2、式细胞术检测细胞周期变化及凋亡率。结果表明：AEoAPC能显著抑制人乳腺癌细胞MCF一7的增殖，且在一定的浓度范围内呈时间和浓度的依赖性；形态学观察发现，细胞形状不规则、变暗、皱缩；FCM检测结果显示，作用72h后G0一G1期(DNA合成前期)的细胞分布有所增加，使细胞阻滞于G期(DNA合成后期)和S期(DNA合成期)；0．8g／LAEo—APC在24、48、72h凋亡率分别为8．65％、14．20％、26．30％，其凋亡程度与时间呈正相关。说明AEoAPC能明显抑制人乳腺癌细胞MCF一7的生长，诱导其细胞凋亡。关键词柞蚕；蛹虫草；抑制作用；乳腺癌细胞；凋亡；细胞周期中图分

3、类号$885．1文献标识码A文章编号1007—0982(2014)03—0023—05乳腺癌在我国发病率较高且近年来有逐渐增加草的化学成分、营养成分和药用功能与冬虫夏草非的趋势¨，临床上治疗癌症主要采用放疗和化疗，常相似，且虫草素等主要活性物质的含量高于野生其手段除了杀伤肿瘤细胞以外，对人体的免疫系统冬虫夏草。目前，用蛹虫草治疗恶性肿瘤的研究已也会造成很大的伤害，因而寻找疗效好、副作用低的有报道l1卜j，那么柞蚕蛹虫草水提物(Aqueousex—治疗药物是近年来科研工作者研究的热点之一l2J。tractfromcordycepmilitarisofantheraeapern

4、yi，AEo—蛹虫草菌寄生在鳞翅目、鞘翅目、双翅目等昆虫蛹体APC)体外抑制人乳腺癌细胞MCF-7增殖及诱导凋上生成的～种虫草混合体，隶属真菌门(Eumycota；亡的作用如何，我们对其进行了探讨，试验结果如Mycobionta)、子囊菌亚门(Ascomycotina)、麦角菌下目(Clavicipitales)、麦角菌科(Clavicipitaceae)、虫草1材料和方法属(Cordyceps)，是我国传统的名贵中药材，具有补肺益肾等多种功效，是扶正祛邪的良药之一。现代药1．1试验材料理学研究证明，蛹虫草主要通过调节机体的免疫功试验材料：人乳腺癌细胞株MCF一7，由大连医

5、能而发挥其生物学活性效应_3j。辽宁省农业科学科大学细胞实验室提供；柞蚕蛹虫草，由辽宁省农业院大连生物技术研究所柞蚕产品研发实验室成功地科学院大连生物技术研究所虫草开发研究室培养提建立了以柞蚕蛹为宿主，大规模人工培育柞蚕蛹虫供。草的技术体系[5-6]。检测分析表明，柞蚕蛹虫主要试剂和仪器：RPMI一1640培养液，购自GIBCO公司；胎牛血清，购自兰州民海生物工程有收稿日期：2014-06-17：修回日期：2014—07一O1限公司；二甲基亚砜(DMSO)，购自天津科密欧试剂资助项目：现代农业产业技术体系建设专项(编号CARS一22)。公司；染色剂噻唑蓝(M1Tr)，购自S

6、igma公司。HE—作者简介：岳冬梅(1978一)，女，内蒙古敖汉旗，硕士，助理研究员。RAcell150型CO培养箱，上海一恒科学仪器有限Tel：13190157575，E—mail：dongmeiyue78@163．eom公司产品；SW—CJ-IF型超净工作台，苏州苏净集团通讯作者：李树英(1959一)，男，研究员。Tel：13804965751．E．mail：13804965751@163．eom产品；BIO—RAD型酶标仪，奥地利Biocell公司产龋黼—瞄嘲注—嘲■———精■幽■■■■■—■—■■■_中国唇业品；LEICADM13000B型相差倒置荧光显微镜，德后

7、，1000r／rain离心5rain，弃上清液，重新悬浮于国Leica公司产品；JEM一1200EX型透射电子显微1mL、4预冷的固定液(固定液组成：1．1g／L葡萄镜，JEOL公司产品；AnkeTDL80—2B型台式离心糖、8．0g／LNaC1、0．4g／LKC1、0．39g／LNa3机，上海安亭科学仪器厂产品产品；EPICS—XL型流PO4·12H20、0．15g／LKH2PO4、0．08g／LMgSO4’式细胞仪，COULTER公司产品。7H0、0．16g／i=CaC1·2H0)中同定。缓慢加入1．2试验方法