苎麻叶斑病病原菌鉴定.pdf

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1、植物病理学报ACTAPHYTOPATHOLOGICASINICA44(3)：318—322(2014)苎麻叶斑病病原菌鉴定杨苗#，石延霞#，杜公福，高苇，谢学文，郭英兰，李宝聚IdentificationofthepathogencausingleafspotdiseaseonBoehmerianiveaYANGMiao，SHIYan—xia，DUGong—fu，GAOWei，XIEXue—wen，GUOYing—lan，LIBao-ju(InstituteofVegeta-blesandFlowers，Chinese

2、AcademyofAgriculturalSciences，Beijing100081，China)Abstract：Leafspotdiseasewasobservedonramie(Boehmerianivea(L．)Gaud)intheplantationinChongqing．ItwasconfirmedthatthepathogenofthediseasewasCorynesporacassiicolabymorphologicalcharacteristics，pathogenicitytestandmol

3、ecularidentification．Thepathogenicitywassignificantlydifferenttothe10plantswithhigherpathogenicitytocowpeaandbean．Thesequencingofthetranslationelongationfactor1alpha(EF—lct)ofCcassiicolafrom10hostplants，togetherwiththepathogenicity，showedtherelationshipbetweenth

4、emtosomeextent．Keywords：ramie(Boehmerianivea)；Corynesporacassiicola；morphologicalcharacteristics；pathogenicity；sequencing文章编号：0412—0914(2014)03．0318．05苎麻[Boehmerianivea(L．)Gaud]属荨麻科麻叶片，观察并记录病害症状。(Urticaceae)苎麻属(Boehmeria)，多年生宿根性草1．2病原菌的分离、培养及形态特征观察本植物。我国苎麻栽培历史悠久

5、，病害及病原种类采用组织分离法进行病原菌分离，纯化后多。2010年，在重庆璧山丁家镇高古村苎麻种植25℃黑暗培养7d，观察并记录菌落培养特征。观区发现一种新病害，该病菌主要为害苎麻叶片，病察病原菌的显微形态，单孢分离后于4~C保存。同害蔓延迅速且危害严重，严重时病叶率达50％以时对实验室保存的黄瓜、甜瓜等9种寄主上的l9上，给当地苎麻产业造成严重损失。为了明确该病株疑似多主棒孢进行形态学鉴定。害的病原菌种类，本文通过形态学鉴定和致病性测定，结合分子生物学技术对病原菌进行系统鉴定，1．3致病性测定确定该叶斑病的病原菌为多

6、主棒孢(Corynespora选用10种供测植物：苎麻、黄瓜、甜瓜、苦瓜、cassiicola)。菜豆、豇豆、茄子、番茄、辣椒和莴苣。将病原菌转1材料与方法至PDA平板25℃黑暗培养15d，用无菌水配成浓度为1xl0个孢子·mL的悬浮液。苎麻5—8片1．1病害调查及症状观察真叶，余者2～3片真叶，喷雾接种，每个处理20株2010年9月至12月，我国重庆璧山丁家镇高幼苗。接种后于20±5~C保湿培养。观察病原菌古村苎麻种植区发现叶斑病，采集具典型特征的苎的侵染，调查各处理植株病情指数，评价其致病力收稿日期：2012．12

7、—30；修回日期：2014．01—23基金项目：大宗蔬菜产业技术体系建设专项(CARS一25)、农业部园艺作物生物学与种质创制重点实验室通讯作者：李宝聚，研究员，主要从事蔬菜病害综合防治研究；E-mail：libj@mail．caas．net．on植物病理学报44卷可连续层出多次使孢子梗形成节节状，分节处颜色测定结果表明，苎麻上分离的多主棒孢可侵染多类加深，大，J、(135．0~260．0)i．zmx(9．0～12．5)m(图寄主，危害多种园艺作物。1．G、H)。将苎麻上的病原菌与Ellis_2报道的多主2．4病原菌分

8、子生物学鉴定及遗传多样性分析棒孢进行比较，二者的形态分类特征及菌落培养性对病菌rDNA—ITS区进行PCR扩增，得到长状都极为相似，故从形态学将其鉴定为多主棒孢。度为433bp的目的片段。测序结果与NCBI中的多主棒孢寄主广泛，可侵染多种蔬菜。本研究基因序列进行比对，与多主棒孢的序列同源性为针对已分离的9个其他寄主来源的19株多主