灰枣和酸枣叶绿体trnL-trnF基因序列分析.pdf

《灰枣和酸枣叶绿体trnL-trnF基因序列分析.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、第31卷第11期河南科学V01．31No．112013年11月HENANSCIENCENOV．2013文章编号：1004—3918(2013)11-1883—04灰枣和酸枣叶绿体trnL—trnF基因序列分析赵志浩，王杰，李振山，管少华，李继东(1．河南农业大学林学院，郑州450002；2．商丘学院风景园林学院，河南商丘476113)摘要：以灰枣和酸枣叶片为材料，用改良的CTAB法提取总DNA，用通用引物对枣叶绿体trnL基因内含子和trnL一mF间隔区进行PCR扩增，得到了trnL基因内含子和trnL—fmF间隔序列片段。并对trnL—mF间隔序列片段回收测序。测序结果

2、符合植物叶绿体基因trnL—tmF间隔序列特征，用DNAMAN软件进行同源性分析，结果表明灰枣和酸枣trnL一mF基因序列同源性为94．78％．枣和酸枣的分类学地位是一个长期争议的问题，初步开展了灰枣和酸枣叶绿体基因序列分析的研究，为研究枣和酸枣分子系统进化提供参考．关键词：灰枣；酸枣；叶绿体基因；序列分析；trnL—trnF间隔序列中图分类号：S665．1文献标识码：ATheChloroplastGeneSequencetrnL-trnFofZiziphusjujubaMil1．‘huizao’andZiziphusjujubavar．spinosaZhaoZhihao

3、，WangJie，LiZhenshan，GuanShaohua，LiJidong(1．CollegeofForestry，HenanA鲥culturalUniversity，Zhengzhou450002，China；2．DepartmentofLandscapeArchitecture，ShangqiuCollege，Shangqiu476113，HenanChina)Abstract：InthisarticlewecollecttheleafofZiziphusjujubaMil1．‘huizao’andZiziphusjujubavar．spinosa(Rhamna

4、ceae)，toisolatethetotalDNAwithmodifiedCTABmethod．ThetrnLgeneintronandtrnL-trnFintergenicspacerareamplifiedwithgeneralprimers．WesequencethetrnL一r几FintergenicspacerandtheresultssatisfythecharacterofplantcpDNA．ThephytoplasmaanalysiswithDNAMANsoftwareshows94．78％homologybetweenthetwosamples．Si

5、ncetheargumentontheclassificationofjujubeandsourjujube，thestudycouldprovidesomereferenceforfutureresearch．Keywords：ZiziphusjujubaMil1．‘huizao’；ZiziphusjujabaVf1．F．spinosa；chloroplastgene；sequenceanalysis；￡rn一mFintergenicspacer枣(ZiziphusujubaMil1．)是我国重要的经济林木之一，已有2700余年的栽培历史．曲泽洲等的研究认为，酸枣是枣的

6、野生种．但是关于枣和酸枣的分类地位，尚存有较大争议，利用形态学、细胞学或分子标记的手段进行的研究往往得出不同的结果．叶绿体DNA是高等植物细胞核外的另一类遗传系统，结构较核基因组简单，在结构和序列上相对保守，非编码区序列比编码区序列表现出更快的进化速率，呈单亲遗传，极少(或没有)发生重组，有独立的进化路线，适合应用于植物系统发育的研究．本文以灰枣和酸枣叶片为材料，用CTAB法提取叶绿体DNA，用通用引物对枣叶绿体trnL基因内含子和trnL—trnF间隔区进行PCR扩增，并对trnL—trnF间隔序列进行测序和序列比对．以期从分子水平上揭示枣和酸枣的亲缘关系，为枣种问亲缘

7、关系分析提供分子佐证，为枣属植物分类提供新的研究方法．收稿日期：2013—07—15基金项目：国家林业公益性行业科研专项(200904024)；郑州市科技领军人才项目(10LJRC179)作者简介：赵志浩(1990一)，男，河南安阳人，硕士研究生，主要从事森林培育研究通信作者：李继东(1976一)，男，河南南阳人，副教授，博士，主要从事经济林育种与栽培研究．2013年11月赵志浩．等：灰枣和酸枣叶绿体trnL一mF基因序列分析一1885一大枣．seqATTTTTATCCTATACTCTCATTTCGTTAGCGGTTCAAAA