生物检测技术论文.doc

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1、华东理工大学继续教育学院2013年上（上、下）半年《生物检测技术》课程小论文任课教师成绩班级牛物110业升学号26110882姓名李建强论文题目：生物检测技术综述论文要求：1、样品前处理的方法2、论述样品的分析方法3、应用举例教师评语:教师签名：年月日备注：论文由任课老师收齐，并注明上交论文的时间、地点，逾期不交者作缺考处理。1:样品前处理的方法1•概述L1生物样品处理制备的主要特点：⑴生物材料的纽成极其复杂，常常包含有数百种乃至儿千种化合物。⑵许多生物样品在生物材料小的含量极微，分离纯化的步骤繁多，流程长。⑶许多生物样品一

2、旦离开了生物体内的环境吋就极易失活，因此分离过程屮如何防止其失活，就是生物样品提取制备最困难之处。⑷生物样品的制备儿乎都是在溶液屮进行的，温度、pH值、离子强度等各种参数对溶液屮各种组成的综合影响，很难准确估计和判断。1.2生物样品的处理制备通常可按以下步骤进行：%1确定要制备的生物样品的H的和要求，是进行科研、开发还是要发现新的物质。%1建立相应的可靠的分析测定方法，这是进行生物样殆制备的关键。%1通过文献调研和预备性实验，掌握生物样品及产物的物理化学性质。%1生物材料的破碎和预处理。%1分离纯化方案的选择和探索。%1产物

3、的浓缩，干燥和保存。1.3样品前处理的方法：1.3.1细胞的破碎不同的生物体或同一•生物体的不同部位的组织，其细胞破碎的难易不一，使用的方法也不相同，如动物脏器的细胞膜较脆弱，容易破碎，植物和微生物由于具有较坚固的纤维素、半纤维素组成的细胞壁，要采取专门的细胞破碎方法。1.3.2过滤及超滤1.3.2.1过滤原理：利用多孔介质阻留固体或大于多孔介质孔径的分子而让液体通过,使固体和液体分离的方法。目的：1）去除不溶性杂质得到所需要的清液以供进一步实验。2）收集固体小间产物或结晶成殆。1.322超滤原理：超滤是一利加压膜分离技术，

4、即在一淀的压力下，使小分子溶质和溶剂穿过一定孔径的特制的薄膜，耐吏大分子溶质不能透过，留在膜的一边，从而使大分子物质得到了部分的纯化。超滤技术优点：操作简便，成本低廉，不需增加任何化学试剂，尤其是超滤技术的实验条件温和，与蒸发、冰冻干燥相比没有相的变化，而II不引起温度、pH的变化，因而可以防止生物大分子的变性、失活和自溶。1.3.3透析透析：膜分离技术的一•种，仅让小分子扩散性的选择性的通过透过膜，把小分子从溶液中分离出去而保留生物大分子的技术。1.3.4.生物样甜的浓缩概念：从低浓度的溶液屮除去水或溶剂使之变为高浓度溶液

5、的过程。生物样殆的制备，提取后往往先要进行浓缩，然后再进行干燥和结晶。方法：1）利用亲水凝胶吸收溶液屮的水分而得到浓溶液。2）超滤法利用半透膜截流大分子，适于浓缩生物大分子。3）离子交换法与吸附法是稀溶液通过离子交换柱或吸附柱，溶质被吸附后，再用少量液体洗脱、分部收集能使所需要物质的浓度提高几倍以至几十倍。4）还有冷冻融化、加沉淀剂、溶剂萃取、亲和层析等方法也能达到浓缩的冃的。1.3.5生物样晶的干燥干燥：除掉潮湿的固体、膏状物、浓缩液和液体样品屮的水分及溶剂的过程。FI的：提高样品的稳定性，以供进一•步的保存分析。方法：1

6、）常压吸收干燥2）真空干燥3）冷冻干燥2:论述样品的分析方法2.1荧光分析法荧光分析的基本原理分子发光：处于基态的分子吸收能量（电、热、化学和光能等）被激发至激发态，然后从不稳定的激发态返回至基态并发射出光子，此种现彖称为发光。荧光和磷光：为紫外光照射某些物质时，由于这些物质结构的特殊性，会发出比吸收波长更长的不同波长的可见光，当紫外光照射停止时，随之消失的光叫做荧光，不立即消失的光叫磷光。2.2红外吸收光谱分析法红外光谱的基本原理光是一种电磁波，根据其波长范围的不同而被命名为各种不同性质的光，如下图所示。其屮波长在0.75

7、-1000^m范围的电磁波，是从可见光区外延到微波区的一段电磁波，习惯上叫做红外光。宇宙射线十卩射线卜X射线

8、紫外马［可见比线红外光线-1微返I无线电波I04IOh红外光通常用波长几表示,但在红外光谱屮习惯用波数表示,单位为cm」两者的关系是:波数（刖7一1）二104波长（/仍7）分子屮慕团的振动和转动能级跃迁产生：振■转光谱辐射-分子振动能级跃迁-红外光谱-官能团-分子结构迁二分一r.2跃动原,->线谢•外紫h.远、外红中、近E线波无电射频区咼P低频率V能量-电子能借IRII紫外Hl［［振动红外200nm400nm*1H8

9、00nm2・5卩15Llm波长'光波诸区及能量跃迁相关图5m核磁共振为用一束具有连续波长的红外光照射一•物质时，如果物质分子中原子间的振动频率恰好与红外光波段的某一振动频率相同，则会引起共振吸收，使透过物质的红外光强度减弱。因此，若将透过物质的红外光用单色器进行色散，就可以得到带有暗条的